小鼠骨髓间充质干细胞多潜能性的鉴定.docVIP

小鼠骨髓间充质干细胞多潜能性的鉴定 第32卷第2期 2011年4月暨南大学学报(医学版)JournalofJinanUniversity (MedicineEdition) Vol. 32 Apr. No. 22011 黄11，21，2111伟，谢琪璇，秦俊文，李威娜，张春雪，肖銮娟 (暨南大学1.生命科学技术学院生殖免疫研宄所；2.再生医学教育 部重点实验室，广东广州510632) ［ ］冃的：鉴定小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的多分化潜能的 起因。方法：从成年小鼠骨髓股骨、胫骨中 2、4、6、8、10d提取总RNA，PCR检测多潜能特征基因和相关因子、 并进行原代培养，分別于0、通过RT-分离MSCs, 3个胚层特征基因的mRNA的表达情况，4和以判断MSCs的特性。结 果:小鼠MSCs中表达多能性标记基因Oct-nanog，Myc。夕卜胚层的nestin、 并且表达与多能性相关的转录因子Klf4和c-中胚层的SM22a和内胚层的 CYP51标记基因均有表达。结论：贴壁纯化的小鼠MSCs除了具有多能性 的干细胞，还可能含有各胚层的原始细胞。［关键词］骨髓间充质干细胞； ［ ］Q786原代细胞培养；RT-PCR；基因表达［ ］ A ［ ］1000-9965 (2011) 02-0136-05 Theidentificationofmultipotentialinmousebone marrow-derivedmesenchymalstemcells 22HUANGWeil, XIEQi-xuanl,, QINJun-wenl,, LlWei-nal, ZHANGChun-xuel, XIAOLuan-juanl (1. InstituteofReproductivelmmunology, CollegeofLifeScienceandTechnology； 2. Key Laboratory JinanUniversity, Guangzhou510632, China) forRegenerativeMedicineofMinistryofEducation, [Abstract] Aim： Toidentifythecauseofmulti-differentiationpotentialinmousebonemarrowmesen -chymalstemcells. Methods： MSCswereisolatedfromthefemursandtibiaeoftheadultmouseandcul-turedinvitr o. TotaIRNAwereextractedfromthemousebonemarrow (DayO) andculturedmouseMSCsat2, 4，6， 8andl0days. ThepluripotencymarkergenesOct-4andnanog, pluripotencyrelatedtranscrip-tionfactorsKlf4andc-Mycandthemarkergenesofth reeembryonallayers, suchasCYP51, SM22 a andnestin， whicharetypicalgenesspecificforendoderm, mesodermandectodermrespectively, weredetectedbyRT-PCRinordertodeterminethecharacteristicsofMSCs. Results： TheresultsofRT-PCRshowedthatmouseMSCscanexpressmRNAofOct-4, nanog, Klf4andc-Myc. Furthermore, inadditiontoSM22a, RT-PCRrevealedthepresenceofmRNAforCYP51andnestinduringtheprimarycultu reofmouseMSCs. Conclusion： MouseMSCs, whichwereisolatedbyadhesionpurification, maybeconsistofpluripo-tentsterncellsandprimarycellsfromthethreegermlayers . [Keywords] mesenchymalstemcells； expressionPrimarycellculture； ReversetranscriptionPCR； Gene [收稿日 期]2010-10-22 [基金项目]国家自然科学基金项目； 211工程3期生物 科学技术与生物医学工程建设项目 [