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超声波辅助提取雀舌草中黄酮类物质工艺的研究
超声波辅助提取雀舌草中黄酮类物质工艺的研究
摘要 以雀舌草为原料、黄酮类物质提取率为指标,通过单因素试验和正交试验确定了超声波辅助提取雀舌草黄酮类物质的最佳工艺条件。结果表明,雀舌草黄酮类物质的最佳提取工艺条件为超声功率225 W、乙醇浓度70%、料液比1∶40、超声提取时间25 min。在此条件下,黄酮类化合物的提取得率可达1.91%。
关键词 雀舌草;总黄酮类物质;超声波辅助提取法
中图分类号 TS255.1 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2017)19-0256-02
Abstract Process of flavonoids extracting from Stellaria alsine by using ultrasonic wave were studied.The yield of flavonoids was considered as the indicator to optimize the main influencing factors of ultrasonic assisted extraction of stellaria alsine by single factor and orthogonal experiment design.The results suggested that extraction yield of flavonoids was 1.91% under the following conditions:the ultrasonic power was 225 W,the ethanol concentration was 70%,the material ratio was 1∶40,the ultrasonic extraction time was 25 min.
Key words Stellaria alsine;total flavonoids;ultrasonic assisted extraction method
中药雀舌草又名田基黄,生长在较湿润环境,在长江流域及其以南各地?V泛分布。其主要功效包括祛风散寒、清热解毒、活血止痛等,临床主要用于治疗伤风感冒、疮疡肿毒、风湿骨痛、跌打损伤、骨折等[1]。现代研究表明,雀舌草含有丰富的黄酮类化合物[2],黄酮类化合物大多具有清除自由基、抗氧化、延缓衰老、降低机体血糖、增强机体免疫力的生理活性[3]。目前国内关于雀舌草黄酮的研究仅见于王小虎等[4]的提取纯化工艺。超声波辅助提取雀舌草中的黄酮类物质,操作简单易行,提取率较高,是一种理想的提取方法。因此,本文探讨了超声波辅助提取雀舌草中黄酮类化合物的工艺条件,以期为雀舌草总黄酮的开发利用提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
试验试剂有芦丁标准品、FeSO4、H2O2、亚硝酸钠、无水乙醇、抗坏血酸、硝酸铝、氢氧化钠、DPPH?、Tris、盐酸、邻苯三酚、邻二氮菲,试剂均为国产分析纯。
1.2 仪器与设备
试验仪器有UV-200型紫外可见分光光度计[尤尼柯(上海)仪器有限公司]、电热恒温水浴锅[上海福玛实验设备有限公司]、AR1140电子分析天平[奥豪斯国际贸易(上海)有限公司]、SB25-12DTD超声波清洗机(宁波新芝生物科技股份有限公司)。
1.3 试验方法
1.3.1 芦丁标准曲线的制作。准确称取22.0 mg芦丁对照品置于100 mL容量瓶中,加入少量浓度50%乙醇溶液充分溶解,然后定容。准确吸取0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0 mL上述液体于50 mL的容量瓶中,加入2.0 mL浓度5%的亚硝酸钠(NaNO2),摇匀后静置6 min,加入2.0 mL浓度10%硝酸铝,摇匀后放置6 min;再加入20 mL浓度4%NaOH,最后用浓度50%乙醇溶液定容,摇匀后静置15 min;以浓度50%乙醇溶液为空白,在510 nm波长下测定吸光度,以溶液吸光度为纵坐标,以芦丁质量浓度为横坐标绘制标准曲线[5]。
1.3.2 单因素试验。准确称取2.0 g雀舌草,固定其他条件不变,分别按照不同的料液比(1∶10、1∶20、1∶30、1∶40、1∶50),添加不同浓度的乙醇溶液(40%、50%、60%、70%、80%),在60 ℃恒温水浴锅中预热1 h,然后在不同的超声功率(200、225、250、275、300 W)下,分别处理15、20、25、30、35 min[6-7],然后过滤并定容至100 mL。
1.3.3 样品中总黄酮类物质含量的测定。精确吸取不同条件下制备的样品提取液1.0 mL置于50 mL容量瓶中,按1.3.1方
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