酶解法提取葡萄酒泥中白藜芦醇工艺的研究.docVIP

酶解法提取葡萄酒泥中白藜芦醇工艺的研究 　　摘 要：研究采用酶解法从葡萄酒泥中提取白藜芦醇，探索其最佳提取工艺，在单因素试验的基础上，以酶浓度、酶解温度、酶解时间为因素进行正交试验。结果表明：酶浓度、酶解时间对白藜芦醇的提取效果有显著影响，最佳提取工艺条件为pH值4.0，酶浓度1.5mg/g，酶解温度40℃，酶解时间75min，在此条件下白藜芦醇提取量为80.2μg/g。 　　关键词：酶解法；葡萄酒泥；白藜芦醇；工艺优化 　　中图分类号 O636.2 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2015）21-35-03 　　Technology for Extracting Resveratrol from Wine Mud through Enzymatic Hydrolysis 　　Shi Qiulan1 et al. 　　（1Alar Quality and Technical Supervision Bureau，Alar 843300，China） 　　Abstract：Resveratrol was extracted from wine mud by alcohol precipitation method with the assistance of enzymolysis，and optimum extraction was explored. The effects of enzyme concentration，enzymatic hydrolysis temperature，and time on the yields of resveratrol were studied by single factor and orthogonal array design methods. The result is that enzyme concentration and hydrolysis time have a significant impact on the effectiveness of resveratrol extract，and the optimum extraction conditions are as follows：pH value 4.0，enzyme concentration 1.5mg/g，enzymatic hydrolysis temperature 40℃ and hydrolysis time 75min. Under such conditions，the yield of resveratrol is 80.2μg/g. 　　Key words：Wine mud；Resveratrol；Enzymatic hydrolysis；Process optimization 　　白藜芦醇（resveratrol，简称Res）又称芪三酚，化学名称为3，4′，5-三羟基二苯乙烯，是植物受到病原性进攻和环境恶化时体内产生的一种次生代谢产物[1]。1963年，Nonomura等[2]提出白藜芦醇是某些草药治疗炎症、脂类代谢和心脏疾病的有效成分后，各国科研工作者陆续提出白藜芦醇具有改善心脑血管循环，抗氧化、抗衰老，抗病毒、保肝，抗肿瘤、抗癌等药理及生物学作用[3-5]。白藜芦醇的制备多从天然植物虎帐、葡萄皮、花生中提取[6-8]，近期的研究发现，葡萄酒泥中含有较丰富的白藜芦醇，含量为28.63～80.48μg/g[9]。目前，大部分葡萄酒泥被当做饲料或肥料使用[10]，利用率极低，更有部分被随意排放，造成环境污染。本研究以葡萄酒泥为原料，以乙醇作为提取剂，采用酶解法提取白藜芦醇，以期为白藜芦醇原料的开发和葡萄酒泥的综合利用提供依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料、试剂与仪器 葡萄酒泥由新疆乡都酒业有限公司提供，为泥状物，经3 000r/min离心，弃去上层清液，沉淀物自然晾干，粉碎之后过80目筛备用；纤维素酶由上海蓝季科技发展有限责任公司提供；白藜芦醇标准品由美国Sigma公司提供；无水乙醇、甲醇、乙酸乙酯等均为AR，由天津市天津市致远化学试剂有限公司提供。UV2000紫外可见分光光度计，日本岛津；756紫外可见分光光度计，上海光谱仪器有限公司；PL303电子天平，梅特勒-托利多仪器有限公司；RE-52旋转蒸发器，上海东玺制冷仪器设备有限公司；KQ-400KDE型高功率数控超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司。 　　1.2 白藜芦醇测定方法[11] 准确称取白藜芦醇标准品0.1g，用甲醇溶解，并定容到10mL，摇匀，备用，得白藜芦醇对照品储备液。取白藜芦醇对照品储备液置于1cm比色皿中，以甲醇为参比，用紫外分光光度计在200～800nm波