母液配制.pptVIP

理论知识： 培养基：是植物组织培养的物质基础，也是组织培养 能否成功的重要因素之一。 培养基的主要成分是植物生长发育所必需的各种营养元素。 成分：水分（主要成分） 无机盐类：大量元素、微量元素、铁盐 有机营养成分：维生素、肌醇、氨基酸等 植物生长调节剂：细胞分裂素类、 生长素类： IAA（吲哚乙酸）、 萘乙酸 （NAA） 培养基类型：MS培养基、B5培养基、N6培养基 MS培养基是由Marashige和Skoog为培养烟草组 织而设计的，是应用最为广泛的培养基。 根据培养材料的种类、有针对性地选择 适宜的培养基，没有任何一种培养基可适合 所有情况下的组织培养。 培养基制备是植物组织培养的基本工作。培养基含 有很多化学成分，而且数量多少不等，性质各有差异。 特别是微量元素、维生素等微量成分，因用量少，不仅 称量麻烦，还容易出现误差，所以配制母液是科学和方便 的方法。使用母液不但可以保证培养基个物质成分的准确 性及配制的方便性，且便于低温保藏，从而提高工作效率。 储备液（母液） 母液是将培养基成分扩大若干倍，一般为10倍、20倍、100倍甚至更高倍数的浓缩溶液。 按试剂种类和性质将其分别称量、分别溶解、分别配制、单独保存或几种混合保存，配制培养基时在按比列吸取即可。 配制母液及培养基时要选用蒸馏水，以免带入杂物质对培养材料产生不利影响。 实验一 MS培养基贮备液（母液）的配制 一、实验目的 熟悉MS培养基的组成，掌 握贮备液（母液）的配制方法。 二、实验原理： 配制培养基时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配制，即将所选培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量，分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存，使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。 以MS培养基为例，所需配制的母液可分为：MS大量元素母液、MS微量元素母液、MS铁盐母液和MS有机化合物母液等。另外，还要配制生长物质母液，在不同类型的培养基中使用。 三、实验器具与药品 电子分析天平、托盘天平、烧杯（50ml, 100ml, 500ml, 1000ml）、量筒（1000ml,100ml, 25ml）、 容量瓶（1000ml,500ml,100ml）、药勺、称量纸、 玻璃棒、滴管、电炉、冰箱。 四、母液配制流程图 按照扩大倍数称量 母液分装 确定培养基 溶 解 定 容 贴标签 保存于冰箱 按顺序混合 五、实验方法及步骤1.大量元素母液的配制 即含N、P、K、Ca、Mg、S六种元素的混合溶液，一般配成浓度为10倍或20倍的母液。 药品名称 规定用量mg /L 扩大倍数 称取量mg 母液定容体积 ml KNO3 1900 10 19000 1000 NH4NO3 1650 10 16500 MgSO4·7H2O 370 10 3700 KH2PO4 170 10 1700 CaCl2·2H2O 440 10 4400 注意： (1) 配制是各化合物应分别称量、分别溶解，经充分溶解后才能混合。 （2）某些无机成分如Ca2+、SO42一、Mg 2十和H2PO4一等在一起可能发生化学反应，产生沉淀物。为避免此现象发生，各种化学药品必须先以少量蒸馏水使其充分溶解后才能混合，混合时应注意先后顺序。速度宜慢，边搅拌边混合。待第一种化合物溶解后再加入第二种化合物，当最后一种化合物完全溶解后，将溶液倒入容1000ml的量瓶中，再加水定容1000ml 。 （3）CaCl2·2H2O要在最后单独加入（因为氯化钙易与磷 酸二氢钾形成磷酸三钙、磷酸钙之类不溶于水的沉淀）。 （4）然后，倒入细口磨砂试剂瓶中，贴上标签，注明配制 日期、扩大倍数、配制人姓名、置于4℃冰箱保存备用。 2.微量元素母液的配制