实验2蛙骨骼肌及心肌收缩LLIU.pptVIP

刺激强度、频率与骨骼肌收缩的关系,心肌收缩记录与心肌特性 实验二 实验目的 实验原理 实验材料 实验内容 注意事项 基本内容 实验目的 1.坐骨神经腓肠肌标本的制备 2.观察刺激强度与肌肉收缩反应的关系。掌握阈刺激，阈下刺激，阈上刺激，最大刺激的概念。 3.观察用不同频率的最大刺激刺激坐骨神经对腓肠肌收缩形式的影响，了解和掌握单收缩、复合收缩、强直收缩特征和形成的基本原理。 4.观察心肌收缩的特点并与骨骼肌比较。 实验原理 1. 阈下刺激 阈强度 阈上刺激 最大刺激 2. 单收缩 不完全强直收缩-描记曲线为锯齿形 完全强直收缩。 3.心肌-具有较长的不应期 期前收缩 代偿间歇 蟾蜍、蛙板、手术剪、敷料镊、刺针、丝线、玻璃分针、烧杯、锌铜弓、任氏液、滴管、RM6240信号采集系统、刺激电极。 实验材料 一．坐骨神经腓肠肌标本制备（第21页） ①破坏中枢神经系统：将探针自枕骨大孔(枕骨大孔定位：以脊柱正中线为纵线，两侧眼后毒腺的连线为横线，两线交汇的凹陷处即为枕骨大孔)插入，先左右横断脊髓，再向前搅毁脑，然后再将探针撤回，反向插入脊椎管破坏脊髓。检查蟾蜍四肢全身肌肉完全松驰。 实验内容 ②剪断脊柱：用粗剪刀自胸部剪断脊柱。 ③剪除前肢及内脏 ④去皮肤 一．坐骨神经腓肠肌标本制备 ⑤分离左右下肢：用粗剪刀沿脊柱中线把标本分为左右两半。注意勿损伤神经。 ⑥分离坐骨神经：大腿背面股二头肌和半膜肌的夹缝中分离出坐骨神经。 ⑦分离肌肉：分离腓肠肌的跟腱，用线结紧，自跟腱的附着点剪断。提起跟腱将腓肠肌剥离出来，并将小腿其余部分剪掉，保留一小段(约1.5cm)股骨， 一．坐骨神经腓肠肌标本制备 一．坐骨神经腓肠肌标本制备 二.刺激强度对肌肉收缩的影响  1.标本与仪器的连接 ①股骨断端固定于肌槽的插孔中，神经干搭在刺激电极上，腓肠肌肌腱上的线与换能器相连，换能器与RM6240相连。 ②点击“实验”菜单，选择“刺激强度对骨骼肌收缩的影响”，仪器参数：通道模式为张力，采样频率400Hz-1kHz，扫描速度1s/div，灵敏度10-30g，时间常数：直流，滤波频率100Hz。 1.标本与仪器的连接 2.观察项目： ①刺激方式单刺激，刺激幅度0.1-3V可调，刺激波宽0.1ms。 ②记录阈刺激和最大刺激值。 ③测量每一刺激强度所对应的肌肉收缩张力；测量最大刺激时肌肉的收缩期和舒张期时间。 三.刺激频率对肌肉收缩的影响 1.点击“实验”菜单，选择“刺激频率对骨骼肌收缩的影响”，仪器参数：通道模式为张力，采样频率400Hz-1kHz，扫描速度1s/div，灵敏度10-30g，时间常数：直流，滤波频率100Hz。 2.系统采用频率递增，刺激幅度：最大刺激强度，波宽0.1ms，采用自动频率方式，起始频率1Hz，结束频率30Hz，步长1Hz，串间隔大于5s。刺激频率按1Hz，2Hz，3Hz，4Hz，5Hz…30Hz逐渐增加，连续记录不同频率时的肌肉收缩曲线。 3.观察测量各刺激频率所对应的肌肉收缩最大张力。 四.蛙心收缩记录及心肌特性（39页） 1.破坏蟾蜍脑和脊髓，暴露心脏，打开心包膜。 用带有丝线的蛙心夹夹住心尖，将丝线连在张力换能器上，再将换能器固定于铁架台上，调整丝线高度，并将丝线拉紧。将刺激电极安放在心室外壁，使之既不影响心搏又能同心室接触良好。 2.张力换能器接RM6240系统第一通道（也可选择其它通道），刺激电极与RM6240刺激输出相连，作刺激标记。 3. 点击“实验”菜单，选择“期前收缩-代偿间歇”，系统进入实验信号记录状态。仪器参数：第一通道，时间常数：直流。滤波频率：10Hz，灵敏度3g，采样频率400Hz，扫描速度1s/div，单刺激模式，阈上刺激强度2-5V，刺激波宽5ms。 四.蛙心收缩记录及心肌特性 仪器连接 在制备标本时，避免过度牵拉神经，避免用手或金属器械触碰神经干。 避免动物皮肤分泌物（蟾酥、血液等）污染神经和肌肉；不要用水冲洗，以免影响组织机能。 制备标本时，要随时用任氏液润湿神经和肌肉，防止干燥。 分离神经时，要把周围结缔组织剥离干净。 实验要迅速，以免时间过长影响标本活性 ◆ 注意事项 ◆ 注意事项 肌肉与换能器的连接松紧适当。 给予刺激时，在按刺激器手动开关的同时，按下记录仪的“标记”，记录刺激标记，用于计算肌肉收缩的潜伏期。 每改变一次刺激频率后，应休息0.5-1 min, 每次刺激不要超过3-4 秒，以免标本疲劳。 实验过程中应常用任氏液润湿标本，以免影响神经和肌肉活性。 NaCl 6.5 g KCl 0.14 g CaCl2 0.12 g Na