胚胎干细胞移植恢复减数分裂和雄性生殖功能的-研究.pdfVIP

目录 第四章胚胎干细胞、孤雌胚胎干细胞和RA诱导的生殖细胞移植…22 第一节导言………………………………………………………………………………．22 第二节实验材料和方法……………………………………………………22 4．2．1细胞系………………………………………………………………………………．．22 4．2．2实验仪器与试剂……………………………………………………………………一23 4．2．3实验方法………………………………………………………………………………23 第三节实验结果………………………………………………………………24 第四节讨论……………………………………………………………………25 第五章胚胎干细胞、孤雌胚胎干细胞和RA诱导的生殖细胞移植恢复 减数分裂和小鼠生殖功能的鉴定………………………………………一26 第一节导言……………………………………………………………………26 第二节实验材料和方法……………………………………………………26 5．2．1实验动物……………………………………………………………………………～27 5．2．2实验仪器与试剂……………………………………………………………………．．27 5．2．3实验方法……………………………………………………………………………．．28 第三节实验结果………………………………………………………………34 5．3．1自然生产后代数目统计、后代基因型鉴定、后代生殖能力检测………………～34 5．3．2精子数目统计、精子活力检测和睾丸重量比较…………………………………一38 5．3．3有丝分裂、减数分裂和生殖系marker检测………………………………………．43 5．3．4生长因子基因表达检测……………………………………………………………．．48 第四节讨论…………………………………………………………………．．48 第六章结论…………………………………………………………………51 参考文献……………………………………………………………………52 致谢………………………………………………………………………．59 万方数据 目录 个人简历……………………………………………………………………60 ～ 万方数据 第一章前言 第一章前言 第一节生殖健康与男性不育症 近些年，不孕不育现象不容乐观，如何保持生殖健康、维护生育能力已经 成为人们关注的焦点。据资料显示，在美国约有7．4％的夫妇不能生育【n，全世 界受到不孕不育疾病困扰的人群更是高达10％．15％，其中25．50％是由男性生殖 障碍所导致的，这一现状在工业化国家愈加明显【2|。随着广大男性生活压力和心 理压力的日益增大，男性的精子在质量和数量上都会受到不同程度的影响，从 而导致不育症患者的人数逐年递增。 不孕不育同时也是癌症治疗所引起的一大副作用。传统意义上的癌症治疗 仅仅致力于疾病的治疗，而忽略了治疗的疗效性和安全性，大约75％的15岁以 下接受癌症治疗的患者享有五年存活率【3】，15岁到44岁的癌症患者在有效地治 疗后存活率也仅为66％【4】。其中，50％．95％的恶性肿瘤患者面临不孕不育的危机， 放疗和化疗使得精子发生和性激素分泌受到阻碍。 减少不孕不育入口的数量已经成为许多卫生组织的首要任务之一，开创新 疗法，造福不孕不育患者，缔造幸福家庭是当今生殖医学的一大重要研究方向。 1．1．1引起男性不育症的外在原因和内在机制 1．1．1．1生活方式和环境因素 生活习惯和生活方式在极大程度上影响着人们的身体健康，包括生殖健康。 许多生活方式因素，比如结婚的年龄、营养的摄取、体重的控制、运动量的多 少和从事的职业等，都会对