奥利亚罗非鱼卵巢芳香化酶基因的克隆-上海海洋大学学报.PDFVIP

第 17 卷第4 期 上海水产大学学报 Vo l. 17 , No.4 2008 年7 月 JOURNAL OF SHANGHAI FISHERIES UNIVERSITY July ,2008 文章编号: 1004 -7271 (2008 )04 - 0411 - 07 奥利亚罗非鱼卵巢芳香化酶基因的克隆、 序列分析和结构预测 唐永凯李建林陈文华2 俞菊华l (1.中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部水生动物遗传育种和 养殖生物学重点开放实验室，江苏无锡 214081; 2. 上海海洋大学水产与生命学院，上海 200090) 摘要:采用 RT-PCR 和 RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends) 法分离出奥利亚罗非鱼卵巢芳香化酶 ( P450aromA) 的全序列，得到 1784 bp 的全长cDNA ，包括38 bp 5 非翻译区，1566 bp 阅读框以及含Poly( A) 信 号(AATAAA) 的 167 bp 3 非翻译区[不包括 Poly( A) J 。阅读框共编码 521 个氨基酸，计算的蛋白质分子量 为59 ku。同源性分析显示，奥利亚罗非鱼P450aromA 的氨基酸序列与其它鱼性腺P450arom 具有70% 以上的 同源性，与其它鱼脑 P450arom 为 60% 左右同源，但芳香化酶高保守区包括 I-螺旋区，芳香化酶特异保守区 II 和血红素结合区 III 和其它鱼芳香化酶的同源性分别高达839毛 -96% ， 789毛 -869毛和 85 -100% 。系统发育 分析表明奥利亚罗非鱼 P450aromA 与鱼类性腺 P450arom 属于同一分支的。生物信息学分析显示:奥利亚罗 非鱼P450A 基因编码的蛋白无信号肤，无跨膜区域，为非分泌蛋白，同时含有多个酷蛋臼激酶 II 磷酸化位点， N-糖激化位点，N- 肉豆遭酌化位点，蛋白激酶 C 磷酸化位点。 关键词:奥利亚罗非鱼;快速扩增 cDNA 末端;P450 芳香化酶 中图分类号:S 917 文献标识码:A Cloning , sequence and function analysis of P450arom from Oreochromis aurea ovary 1 1 2 1 TANG Yong-kai , LI Jian-lin , CHEN Wen-hua , YU Ju-hua (1. Key Laboratoryfor Genetic Breeding ofAquatic Animals and Aquaculture Biology ,Ministry ofAgriculture , Freshwαter Fisheries Reseαrch Center , Chinese Academy of Fishery Sciences ,WIμxi 214081 , Chinα; 2. College of Fisheries and Life , Shanghai Ocean University , Shanghai 200090 , China) Abstract:The cDNA encoding ovarian P450arom (P450arom