卷丹百合不同发育期鳞茎中四种活性物质含量变化剖析.docVIP

卷丹百合不同发育期鳞茎中四种活性物质含量变化剖析 　　摘 要 以生长期的卷丹百合鳞茎为试验材料，分别在植株生长的现蕾期、绿蕾期、红蕾期I、红蕾期II、红蕾期、开花期、枯萎期和鳞茎收获期取样，测定多糖、总皂苷、酚类和生物碱含量的变化规律，旨在为鳞茎的合理应用提供依据。结果表明：上述4种活性物质在鳞茎中的积累，表现出相似的变化规律。即上述4种化学物质的含量从现蕾期至鳞茎收获期，均有两个高峰和两个低峰的积累时期。其中：最大峰值呈现的时期因测定的物质不同而不同，相对较小的高峰值均出现在鳞茎收获期；低峰出现的时期为现蕾期和开花期。最大峰值与相对较小峰值比较，除多糖含量达到显著差异外，其他3种活性物质的含量差异不明显。 　　关键词 卷丹百合；鳞茎；活性物质；含量变化 　　中图分类号：S682.29 文献标志码：A 文章编号：1673-890X（2016）12--03 　　卷丹百合（Lilium.lancifolium Thunb）是百合科百合属植物，是重要的观赏花卉，其鳞茎又可食用和药用，亦是《中华人民共和国药典》规定入药的3种百合之一[1-3]。目前，有关百合的药用成分研究中，其主要包括多糖、皂苷、多酚和生物碱等重要药用化学成分的提取工艺及分离纯化[4-7]，而植株发育不同时期鳞茎中活性物质动态变化规律的研究，在国内除李红娟[8]报道了不同栽培条件下鳞茎活性物质的变化特点外，其他尚鲜见报道。为此，本试验选择卷丹百合植株生长发育不同时期鳞茎，进行了多糖、皂苷。多酚和生物碱共4种重要活性物质含量的测定，旨在揭示动态变化规律，进而为合理利用卷丹百合的鳞茎提供依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　试验材料取自吉林伊通满族自治县百合产业基地的卷丹百合，本基地立足伊通山区，具有资源优势和地理气候特点，常年年有效积温在15～25 ℃，土地肥沃，短日光，年降水量小于400 mm，栽培采用大田直播的栽培方式，使其常年开放。 　　本试验中，按下述植株生长发育各时期的特征，取鲜嫩鳞茎，烘干，打粉，过40目筛，备用。 　　现蕾期：植株花蕾出现的时期。时间为2015年7月2日。绿蕾期：植株出现大部分绿蕾的时期，时间为2015年7月13日。红蕾期I：植株少部花蕾出现分微红，花蕾手感坚实，时间为2015年7月25日。红蕾期II：植株大部分花蕾出现微红，花瓣尚未开裂，时间为2015年7月30日。红蕾期：植株花蕾全部呈现红色，花蕾手感蓬松，花瓣略微开裂但尚未展开，时间为2015年8月6日。开花期：植株花瓣开展，达到其花冠的典型特征，时间为2015年8月15日。枯萎期：植株部分叶片枯萎，蒴果颜色呈深褐色，尚未开裂，时间为2015年9月4日。收获期：植株叶片全部枯萎，蒴果开裂，开始收获鳞茎，时间为2015年9月29日 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 多糖含量的测定 　　采用超声波沉淀法测定[9]。取上述备用样品1 g溶于5 mL蒸馏水中，超声2 h，8 000转离心10 min，取其上清液，之后加入无水乙醇，使醇浓度达到90%，4 ℃静止一夜，10 000转离心10 min，取沉淀溶于10 mL的水中，加入氯仿：正丁醇=5∶1，10 000转离心10 min，上清液稀释100倍后，取2 mL再加入5%苯酚1.0 mL、浓硫酸5 mL，摇匀，沸水浴20 min，静置10 min。在490 nm处测定吸收度，以葡萄糖为对照品，根据吸光值进行含量的测定。 　　1.2.2 总皂苷含量的测定 　　按文献[10]进行。以薯蓣皂苷为对照品，根据甾体皂苷类化合物的香草醛-高氯酸显色反应，用分光光度法在 535nm波长处测定吸光度，计算样品中总皂苷的总量。 　　1.2.3 总酚含量的测定 　　按文献[11]进行。以没食子酸为对照品，通过总酚类化合物的Folin-Cioealteu比色法 （FC 法），用分光光度法在760 nm处，测得其吸光度计算总酚含量。 　　1.2.4 总生物碱的测定 　　称取样品百合2g与30 mL盐酸（0.01mol/L）超声提取2 h，5 000 r，10 min后取上液，调pH到12～13（40%NaOH），8 000 r离心10 min取沉淀，氯仿萃取分别用10 mL，5 mL，5 mL，旋转蒸发至干，称其重量得其总生物碱[12]。 　　2 结果与分析 　　2.1 多糖含量的变化 　　多糖含量的变化表现为现蕾期迅速上升至绿蕾期到最大值592.8 mg/kg，然后开始下降至开花期达到最低值，此期鳞茎多糖的含量为绿蕾期的46.54%。开花期后又开始缓慢上升至鳞茎收获期达到第2个多糖积累高峰期，此高峰期的多糖含量为绿蕾期的77.01%，但高于其他各取样测定时期的多糖含量（见图1）。由表1看出，绿蕾期多糖