红细胞检验基本方法概述.ppt

红细胞检验的基本方法 1.来源 2.形态 3.功能 红细胞疾病 1.缺铁性贫血 IDA blood smear 本章 概况 1.有关铁指标、叶酸和维生素B12的检验。 2.红细胞膜缺陷、酶缺陷的检验。 3.血红蛋白异常的检验。 4.PNH的检验。 5.免疫性溶血的检验。 铁指标检验的几个概念 1.血清铁(serum iron )。 2.血清转铁蛋白(serum transferrin)。 3.血清铁蛋白(serum ferritin)。 4.血清总铁结合力(TIBC)。 5.转铁蛋白饱和度。 1.原理 1、原理： 3、临床评价： 1、原理： 1、原理： 小低贫的初步诊断 1.HGB（g/L） 男性120 女性110 2.HCT 0.35 男性0.40 女性 3.RBC （1012/L） 男性4.0 女性3.5 4.MCV(fl) 80 fl=10-15L 5.MCH (pg)27 pg=10 –12g 6.MCHC 0.32 血清铁指标检验的应用 小细胞低色素性贫血的鉴别 铁 总铁结合力 铁饱和度 铁蛋白 缺铁贫 减低 增高 减低 减低 ?地贫 正常 正常 正常 正/高 慢感贫 减低 正/低 减低 增高 铁粒贫 增高 减低 增高 增高 体积不同红细胞的形态 第二节 叶酸和维生素B12 的检验 一、血清和红细胞叶酸测定 1、原理： 1、原理： 1、原理： 1、原理： 第三节 溶血的检验 一、红细胞寿命测定  1、原理： 溶血的检验 1.血浆(plasma)：血液中除去红细胞、白细胞、血小板的无形成分，含有除钙离子外其他所有凝血因子。 2.血清(serum)：血液自然凝固后分离出来的淡黄色液体，缺少某些凝血因子(Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅷ因子)。 1、原理 1、原理 1.原理 1、原理： 第四节 红细胞膜缺陷的检验 一、红细胞渗透脆性试验 1.原理 1、原理： ①遗传性球形红细胞增多症自身溶血率增加，加入葡萄糖或ATP后明显纠正。 ②G－6－PD缺乏症等戊糖旁路代谢缺陷的病人自身溶血率增加，能被葡萄糖纠正。 ③丙酮酸激酶缺乏症时不能利用葡萄糖产生ATP ,其自身溶血率明显增加，加葡萄糖不能纠正，加ATP可纠正。 ④获得性溶血性贫血或自身免疫性溶血时试验结果常各有不同，对诊断意义不大。 ⑤本试验不够敏感和特异，仅对遗传性球形红细胞增多症有较大诊断价值. 1、原理： 1、原理 1、原理： 1、原理： 第五节 红细胞酶缺陷的检验 一、高铁血红蛋白还原试验 1、原理： 1、原理： 1、原理： 1、原理： 第六节 血红蛋白异常的检验 一、红细胞包涵体试验 1、原理： 1、原理： 2、参考值： 3、临床评价： 1、原理： 1、原理： 1、原理： 1、原理： 1、原理 1、原理： 1、原理： 1、原理： 第七节 PNH的检验 一、酸化血清溶血试验 1、原理： 1、原理： 第八节 免疫性溶血性贫血的检验 1、原理： 2、参考值： 谢谢！ 二、自身溶血试验及其纠正试验 红细胞在37℃孵育48小时，其间由于膜异常 引起钠内流倾向明显增加，ATP消耗过多； 或糖酵解途径酶缺乏所引起ATP生成不足等 原因可导致溶血，称为自身溶血试验。在孵 育时，加入葡萄糖或ATP作为纠正物，观察 溶血可否有一定的纠正，称为纠正试验。 2、参考值： 正常人红细胞孵育48小时,不加纠正物的溶血 率＜3.5％，加葡萄糖的溶血率＜1.0％，加 ATP纠正物的溶血率＜0.8％。 3、临床评价： 二、自身溶血试验及其纠正试验 三、红细胞膜三磷酸腺苷活性测定 Na＋－K＋－ATP酶、Ca2＋－Mg2＋－ATP酶和Mg2＋－ATP 酶都是红细胞膜上的ATP酶。为测定酶的活性可分别测定酶作用于ATP的水解产物无机磷含量，若在基质中只加入Ca2＋－Mg2＋－ATP酶可测定Ca2＋－Mg2＋－ATP酶的活性，若在基质中加入Na＋、K＋、Mg2＋和ATP，测定的为Na＋－K＋－ATP酶和Mg2＋－ATP酶的共同含量，再在基质中加入Na＋－K＋－ATP酶的抑制剂，测定结果仅为Mg2＋－ATP酶活性，两者的差为Na＋－K＋－ATP酶活性。 2、参考值: 红细胞膜Na＋－K＋－ATP酶：（2.93±0.67）mU／109 红细胞Ca2＋－Mg2＋－ATP酶：0.4～2.5μmol／L－1·mg 膜蛋白·h－1 3、临床评价： 遗传性球形红细胞增多症：Na＋－K＋－ATP酶活性增加，Ca2＋－Mg2＋