埃及品系尼罗罗非鱼不同选育世代间遗传潜力剖析.docVIP

埃及品系尼罗罗非鱼不同选育世代间遗传潜力剖析 　　摘要：选用25个微卫星基因座对连续3个选育世代的埃及品系尼罗罗非鱼进行检测，通过分析世代间的遗传差异来探讨埃及品系尼罗罗非鱼的保种现状和遗传潜力。结果表明，3个世代群体在25个微卫星基因座中共检测出105个等位基因，不同基因座上的等位基因数为2～7，3个世代群体的平均有效等位基因数（Ae）分别为2.59、2.52、230个，平均期望杂合度（He）分别为0.547、0.545、0.518，平均观测杂合度（Ho）分别为0.479、0.457、0.451，平均多态信息含量（PIC）分别为0.487、0.480、0.458，3个世代群体遗传多样性水平较高，世代间各遗传参数随世代数增长呈略微下降趋势，但差异不显著（P0.05）；3个世代间遗传分化指数（Fst）在0.017～0.048之间，均小于0.05，遗传分化程度相对较低；通过分子方差对遗传变异来源分析表明，经过选育群体世代间的遗传分化较小，世代间变异仅占总变异的334%，分化主要来源于世代内个体间的遗传差异。目前，采用保种选育方法对埃及品系尼罗罗非鱼世代间的遗传信息较为稳定，具有较高的遗传潜力。 　　关键词：埃及品系；尼罗罗非鱼；选育世代；微卫星；遗传多样性；遗传潜力 　　中图分类号： S917.4文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）02-0184-04 　　收稿日期：2013-07-29 　　基金项目：现代农业产业技术体系专项（编号：CARS-49）；中央级公益性科研院所基本科研业务费专项（编号：2013JBFM01）；现代农业人才支撑计划（编号：2130106）。 　　作者简介：王腾（1990―），女，山东临沂人，硕士，研究方向为鱼类遗传育种。E-mail：wangteng0416@163.com。 　　通信作者：杨弘（1966―），男，江苏无锡人，研究员，主要从事鱼类育种工作。E-mail：yangh@。尼罗罗非鱼（Orechromis niloticus）原产于非洲，具有生长速度快、食性杂及抗病力强等优点，是联合国粮农组织（FAO）向世界各国推荐的主要养殖品种之一。自1978年引进我国以来，罗非鱼养殖在我国得到迅速发展，现已成为我国淡水养殖的重要品种。优良的苗种是保证罗非鱼成鱼品质的关键，因此，良种的选择和培育是保障优良苗种供给、实现我国罗非鱼产业稳定发展的决定性因素。为此，1999年，中国水产科学研究院淡水渔业研究中心从埃及农业和农垦部水产研究中心实验室引进尼罗罗非鱼基础群体5 000尾，在南泉养殖基地采用闭锁群体继代选育法，以生长速度和尾鳍条纹为主要选择目标，2年1个世代，选择总强度为30%左右。经过多年选育，该群体生长、经济性状进一步得到提高，现已成为1个新的优良品系[1]。目前，群体选育法已经较多地用于罗非鱼的选育工作，往往重视经济性状的选择，在分子水平上对遗传变化的跟踪研究却较少，忽略了群体遗传型变化可能会导致遗传多样性的降低，从而降低遗传效应，造成遗传瓶颈效应。 　　近年来，分子标记技术已经广泛应用于水产动物的亲缘关系鉴定、物种多样性检测、种质资源的保护以及基因连锁图谱的构建和基因定位等领域[2-5]，在开展品种选育时，对群体遗传结构影响的研究也有一些成果。Romana-Eguia等利用微卫星标记对尼罗罗非鱼不同选育世代的研究、Patricia等利用RAPD技术对不同世代凡纳滨对虾群体遗传多样性的分析，结果均显示选育世代遗传多样性有逐代降低的趋势[6-7]；颉晓勇等对吉富品系尼罗罗非鱼选育群体遗传变异分析发现，随着选育的进行，群体遗传参数逐渐降低，群体呈现出纯化趋势[8]。本研究拟采用微卫星标记对埃及品系尼罗罗非鱼3个世代保种群遗传变异进行检测，初步评价埃及品系尼罗罗非鱼在现有选育方式下的保种现状及遗传潜力，了解尼罗罗非鱼在保种选育过程中遗传型的变化，为制定更加合理有效的保种方案提供理论依据，为其他品种的引种和保种工作提供参考。 　　1材料与方法 　　1.1试验材料 　　1.2方法 　　1.2.1基因组DNA的制备采用常规酚-氯仿法制备基因组DNA，并通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测其浓度和纯度，稀释至100 ng/μL，作为PCR扩增的模板。 　　1.2.2微卫星引物的设计本研究中使用的引物均从已发表的尼罗罗非鱼遗传连锁图谱中选取[9]，按照互不连锁的原则，从不同的连锁群中选择具有多态性的25个微卫星基因座，相关信息见表1。引物由上海申能博彩公司合成。 　　1.2.3PCR扩增及电泳检测反应体系：10×Buffer（Mg2+ Free）2.5 μL，MgCl2（25 mmol/L）1.5 μL，微卫星上下游引物（10 μmol/L）各1.5 μL，dNTP