龟鹿二仙胶与其拆方对体外培养大鼠关节软骨细胞凋亡的影响.pdf

(Po．01)；龟鹿二仙胶组、OTL组与龟板、鹿角、人参、枸杞比较有显著差异 口o．05)；龟板、鹿角与人参、枸杞比较有统计学意义(P0．05)。流式细胞仪测 定SNP诱导后软骨细胞的凋亡率结果显示：lmmol／L的SNP对软骨细胞增殖的 抑制作用最适宜。 3．免疫细胞化染色结果显示：经SNI诱导后，各组标本均可见励：基因Bax, bcl-2表齿bcl-2表达部位为胞浆，可见棕黄色颗粒状或片状阳性染色，Bax表达 部位为胞核及胞浆，可见棕黄色片状或颗粒状阳性染色，阴性对照未见异常染色； 龟鹿二仙胶干预组与生理盐水对照干预组比较有显著差异(P0．01)；龟鹿二仙 胶、OTL干预组与各拆方干预组比较有统计学意义(Po．05)；龟板、鹿角干预组 与人参、枸杞干预组比较有统计学意义(Po．05)。 4．荧光定量PCR结果显示：各药物组和对照组在荧光定量PCR过程中， Bax、bcl-2基因的荧光信号在进入指数期时，荧光信号被检测到且呈指数增长， 各药物组Bax、bd-2的溶解曲线均为单一峰，表明定量准确，得出的表达量值可 信；各药物组数值在Bax表达中与生理盐水干预对照组成反比，在bcl-2表达中 与生理盐水干预对照组成正比；龟鹿二仙胶干预组、oTL组Bax、bcl-2的表达 量与其拆方组比较有统计学意义(P0．05)；龟板、鹿角组与人参、枸杞组比较有 显著差异@0．05)。 结论： 龟鹿二仙胶及其拆方可明显促进体外培养大鼠关节软骨细胞增殖且无递增 效应；复方及各拆方中剂量含药血清48h时药效最佳，复方药效优于各拆方，总 体药效比较为：龟鹿二仙胶龟板》鹿角人参枸杞；在复方中发挥主导作的是龟 板与鹿角，可作为今后研究的重点；人参药效不及龟板、鹿角，提示人参只有在 病损状态下才能完全发挥补虚、补气的效果；枸杞只是在方中发挥协同作用来增 强复方疗效，今后可调整用量或删除配伍；龟鹿二仙胶及其拆方含药血清均可抑 制由SNP诱导的经NO途径进行的软骨细胞凋亡，这种过程可能与对抗经NO 抑制软骨细胞内线粒体及柠檬酸循环有关的酶有关；可在翻译水平对SNP诱导 后的软骨细胞bcl．2与Bax的表达具有良好维持作用，这种作用主要体现在凋亡 早期通过下调Bax基因的表达量来抑制软骨细胞的凋亡。 2 关键词： 骨性关节炎(oA) 龟鹿二仙胶 含药血清 软骨细胞 硝普钠(SNP) 细胞凋亡 bax、twl-2 本课题研究经费受“国家自然科学基金、福建省高等学校新世纪 优秀人才支持计划(闽教科[2007120号)一项目资助。 3 Guiluerxian Glueandits rat oncultured decomposition articular cartilageapoptosis Science Specialty：Orthopedics Graduate：LuoHuan sheng LiNan Supervisor：Professor Abstract Purpose： articular ofrat cellsinvitro toobservetheturtle Application cart