葛根粗提物与葛根素对人小细胞肺癌H446细胞生长的作用与其机制.pdfVIP

中立摘罄 葛根轲l提物及葛根素对人小细胞肺Il；；H446细胞生K的作用及Jt-学L制 方向。 因此，本课题拟在CP和sP作用H446细胞后，应用显微镜观察、凋亡形态 学观察、M丌法、流式细胞术和细胞免疫化学方法等对其细胞形态、细胞增殖， 细胞凋亡和细胞周期等生物学行为，以及与细胞增殖、凋亡和细胞周期相关的蛋 白进行研究，了解CP和SP对H446细胞的增殖抑制、摘亡诱导和细胞周期调控 的作用，并进一步在蛋白水平阐明其作用机制，从而为CP和sP应用于临床治 疗肿瘤提供理论基础。 目的 1．探讨葛根粗提物及其主要成份葛根素对H446细胞增殖活力，凋亡率和细 胞周期分布的影响，研究CP和sP抑制人小细胞肺癌细胞生长的作用，并对两 者的生物学效应进行比较。 2．初步探讨葛根粗提物及其主要成分葛根素抑制H446细胞增殖，诱导其凋 亡，改变其细胞周期分布的机制． 后，H446细胞生长抑制率． 2．利用凋亡细胞形态学检测方法，观察CP和sP引起的H446细胞形态学改 变． 3．通过流式细胞术分析CP和sP作用于H446细胞后，细胞凋亡率和细胞周 期分布情况。 4．采用细胞免疫化学方法和流式细胞术检测细胞增殖核抗原，细胞凋亡和 细胞周期相关蛋白表达情况。 结果 1．CP和sP均可不同程度的抑制H446细胞的生长，且呈剂量．效应关系和时 间．效应关系。 2 中文摘婴 葛根粗提物及葛根素对人小细胞肺癌H446绑胞生K的作用及Je帆制 2．相同条件下，CP对H446细胞生长的抑制作用比SP强，差异有统计学意 义(Po．05)。 3．CP和sP作用于H446细胞后，细胞呈现典型凋亡细胞特征，且定量分析 表明，细胞凋亡率分别为14．71％和2．61％，CP组凋亡率高于对照组凋亡率，差 异具有统计学意义伊如．05)。 4．细胞周期分布表明：CP和SP作用于H446细胞后，G0／GI期细胞构成比 组相比，差异均具有统计学意义Cp∞．05)。 5．细胞周期动力学显示。CP和sP作用于H446细胞后，细胞增殖指数减少， 与对照组相比，差异具有统计学意义(P．弧05)，且CP组细胞增殖指数小于SP组， 差异具有统计学意义(P瑚．05)． 6．CP作用于H446细胞后，PCNA蛋白表达量减少，与对照组相比，差异 相比，差异无统计学意义(p0．05)。 于H446细胞后，Bax／Bcl-2比值高于SP，差异具有统计学意义(Po．05)。 8．CP和SP作用于H446细胞后，Fas蛋白表达量均增加，与对照组相比， 差异具有统计学意义(P《o．05)，且CP使细胞Fas蛋白表达量高于sP，差异具有 统计学意义(户如．05)． 9．CP和SP作用于H446细胞后，CDK2蛋白表达量减少，与对照组相比， 光指数低于SP，P27蛋白的荧光指数高于SP，差异均具有统计学意义俨o．05)。 结论 1．CP和SP均具有抑制H446细胞生长的作用，且在相同条件下，CP的抑制 作用较SP显著。 2．CP可以诱导H446细胞凋亡，而姊无此作用。 中文摘要 葛根轲I提物及葛根豢对人小细胞肺癌H446细胞生氏的作用及K-OL制 4．CP可能通过下调PCNA蛋白的表达而抑制H446细胞的增殖。 5．CP可能通过调节Bax和Bcl-2蛋白的表达比例而促进H446细胞的凋亡． 6．CP可能通过上调Fas蛋白的表达而诱导H446细胞的凋亡． CDK2等GI期激酶复合物，阻止细胞通过(31／S期检查点，使细胞阻滞于G1期。 关键词 葛根粗提物、葛根素，细胞生长抑制率、凋亡率、细胞周期、PCNA、Bax、 Bcl-2、Fas、cyclinDl、CDK2、CDK-、P27 4 英文摘要 葛根轲【提物及葛根鬃对人d,flJl胞肺癌H446细胞生长的作用及je机制 TheEffectandItsMechanismofCPandSP H446Cell onHumanSmallCell Cancer