ZZAP和P放散AT阳性红细胞的效果分析.docVIP

ZZAP和CDP放散DAT阳性红细胞的效果分析 曹克伟 胡小兵(周口市中心血站河南周口 466000) 】目的：比较ZZAP和CDP两种放散方法放散DAT(+)红细胞的效果及放散 后红细胞吸收自身抗体的能力，为DAT(+＞红细胞的抗体放散方法提供依据。方法: 收集木站送检的DAT(+)交叉配血标木，选择抗-IgG型与抗-(lgG+C3d)复合型各 20例作为研究对象，分别采用ZZAP和CDP两种放散方法进行抗体放散试验，对 放散后红细胞分别进行DAT试验;用放散后的红细胞吸收患者自身血浆自身抗体 后进行交叉配血试验，评价自身抗体的吸收效果。结果：抗-(lgG+C3d)复合型 DAT⑴红细胞用ZZAP和CDP放散效果无差别(Pgt;0.05), ZZAP放散抗-IgG型的 效果好于抗-(lgG+C3d)复合型(Plt;0.05), CDP放散抗-IgG型与抗-(lgG+C3d) 复合型的效果无差异(Pgt；0.05)； ZZAP放散抗-IgG型和抗-(lgG+C3d)型复合 型DAT(+)红细胞后的抗体吸收效果均好于CDP (Plt;0.05), ZZAP和CDP放散抗 -IgG型DAT(+｝红细胞后的吸收效果无明显差异(Pgt;0.05), CDP放散抗-IgG型 和抗-(lgG+C3d)复合型DAT(+)红细胞后的吸收效果无差别(Pgt；0.05), ZZAP 放散抗-IgG型DAT阳性红细胞后的吸收效果均好于抗-(lgG+C3d)复合型 (Plt;0.05)o结论：抗-(lgG+C3d)型复合DAT(+)红细胞用两种方法均不能很好 的解离自身抗体，但对抗-IgG型自身抗体的解离用ZZAP方法好于CDP，提示临 床交叉配血实验中对抗-(lgG+C3d)型复合自身抗体最好选盲配血的方法，对抗 -IgG型自身抗体用ZZAP进行吸收放散效果较好。 关键词】ZZAP； CDP；放散试验；自身抗体；AIHA； DAT；红细胞 】R556 】A 】1007-8231 (2011) 07-0455-03 自身免疫性溶血性贫血(AIHA)是一类由自身抗体和(或)补体吸附于红细 胞表面，导致红细胞破坏增加而引起的溶血性贫血。有报道自身抗体大部分同 Rh阳性红细胞有高度亲和性，显示抗体的血型抗原特异性［1］，但临床多认为 其具有非特异性。对温反应性自身抗体的分型抗体类型以lgG+C3d型最多 (62.96%),其次为IgG型(20.37%)及C3d型(16.67%),但也有报道发现自 身抗体以IgG型多于lgG+C3d型，未发现仅C3d型［2］。AIHA患者中直接抗球 蛋白试验(DAT)阳性率高达96%-98%,原因是红细胞的自身抗体或者免疫复合 物黏附在红细胞膜上CR1受体引起的［3］，往往给ABO及Rh血型检查和交叉配 血造成困难。血库或输血科对这类需要输血的患者进行交叉经常捉襟见肘，如何 获得未被自身抗体致敏的红细胞进行血型鉴定和交叉配血就成了难点。为此我们 对临床上常用的两种解离温自身抗体的方法木瓜酶/二硫苏糖醇(ZZAP)和磷酸 氯喹(CDP)进行放散和吸收效果的对比分析研究，现报道如下。 1对象和方法 1.1研究对象：收集2009年1-12月来自周U市中心医院送检的疑难配 血患者血样，红细胞直接抗蛋白实验(DAT)阳性，随机选择经自身抗体分型后 抗IgG型自身抗体阳性血样20例，抗lgG+C3d复合型自身抗体血样20例，且均 存在交叉配血实验主侧和次测均阳性，排除IgM型冷自身抗体的干扰。 1.2试剂和仪器：抗人球蛋白微柱凝胶卡由Diana公司提供(批号： 8139.01), ZZAP试剂由长春博得生物技术冇限公司提供(批号,筛 选细胞由长春博得生物技术有限公司提供(批号, CDP试剂由上海 血液生物医药有限公司提供，自身抗体分型卡(抗IgG和抗lgG+C3d)由Diana 公司提供(批号：6001.01),微柱凝胶法专用孵育器和专用离心机(Diana公司 提供)，KUBOTA血清学专用离心机(KA-2200)，普通离心机(80-2)等。 1.3方法 1.3.1 ZZAP试剂放散方法：将0.5ml的1%半胱氨酸激活的木瓜酶溶液、 2.5ml 0.2M二硫苏糖醇、2ml PH 6.5PBS混匀调整PH值为6.0-6.5后作为应用液。 温自身抗体的自身吸收方法为取两支试管，各分别加lml压积红细胞，2ml ZZAP 试剂混合，不时摇动试管，37°C,30mino后用生理盐水洗涤红细胞3次，最后依 次彻底除去上清，取少量做DAT,其余压积红细胞加入同体积的血清，混合均匀， 37°C吸收30min,然后离心收集吸收后的血清，选用ABO和Rh血型相同的红细 胞作为供者，与上述血清用微柱凝胶