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药典方法——凝胶净化-固相萃取-气质法测定人参中 的22种有机氯 北京莱伯泰科仪器股份有限公司 前言： 有机氯类农药是使用最早、应用最广的杀虫剂之一，50-60年代在全世界广泛生产和应用，曾在防治害虫上起过积极作用。但其对环境的污染较为严重，大量使用会直接造成对农作物的污染，同时农药残留在水和土中，通过食物链进入人体，而人体又不易通过新陈代谢把它排出体外，当积累到一定程度，就会使人中毒，造成肝肾脏器损害。2015版药典增加了22种有机氯类农药残留量测定的新方法，以此来监控中药中有机氯类农药的残留情况。 本实验参考2015版药典第四部通则2341第二法中第2项方法，以常见白参为样品，简要介绍了人参提取液净化、浓缩到检测的一整套方法。使用了莱伯泰科AutoClean全自动凝胶净化系统、Sepline-S2全自动固相萃取系统和MultiVap-8八通道平行浓缩仪。实验方法简便、回收率较高且平行性良好，适用于人参中22种有机氯类农药的检测。 关键词：人参，22种有机氯，2015版药典，第四部，通则2341，AutoClean，Sepline-S2，MultiVap-8 1、实验部分 1.1仪器与试剂 AutoClean全自动凝胶净化系统（莱伯泰科公司）； Sepline-S2全自动固相萃取系统（莱伯泰科公司）； MultiVap-8八通道平行浓缩仪（莱伯泰科公司）； QHS-66多样品快速均质系统（莱伯泰科公司）； 7890B气相色谱-5977B质谱联用仪（安捷伦公司）； 22种有机氯标准品（10μg / mL，溶剂为异辛烷，中国食品药品检定研究院）； 乙酸乙酯（色谱纯）；环己烷（色谱纯）；丙酮（色谱纯）；正己烷（色谱纯）；异辛烷（色谱纯）； 凝胶渗透色谱柱（400mm×25mm，BIO-Beads S-X3填料）； 弗罗里硅土固相萃取柱（1000mg/6mL，LabTech） 1.2标准工作液配置 移取1000μL的有机氯标准品溶液至10mL的容量瓶中，用异辛烷定容至刻度，摇匀。配成浓度1μg/mL的溶液，作为标准储备液。 精密吸取500μL的上述标准储备液至10mL的容量瓶中，用异辛烷定容至刻度，摇匀。配成浓度50ng/mL的溶液，作为标准工作液。 1.3土壤样品处理 1.3.1 提取 将白参样品粉碎成粉末（过三号筛），混匀，取约1.5g，精密称定，置于50mL聚苯乙烯具塞离心管中，加入水10mL，混匀，放置2小时。 加入乙腈15.0 mL，均质1分钟，再加入预先称好的无水硫酸镁4g与氯化钠1g的混合粉末，再次均质1分钟后，离心（4000转/分钟）1分钟。 吸取上清液10.0 mL，40℃浓缩至近干，用乙酸乙酯-环己烷（1:1）混合溶液分次转移至10mL量瓶中，加乙酸乙酯-环己烷（1:1）混合溶液至刻度，摇匀，转移至预先加入1g无水硫酸钠的离心管中，振摇，放置1小时，离心（必要时过滤），取上清液至AutoClean全自动凝胶净化系统的进样瓶中（上清液要大于6mL）。 1.3.2 凝胶净化 将1.3.1中装有提取液的进样瓶放置在AutoClean全自动凝胶净化平台，并按照图1在软件中编辑方法，开始凝胶净化，净化后收集液收集在50mL近干浓缩杯中。 图1 凝胶净化方法图 1.3.3 浓缩 直接将50mL近干浓缩杯移至MultiVap-8八通道平行浓缩仪中，40℃氮吹浓缩，中间用少量正己烷淋洗几次，浓缩至近干，加入1.0 mL正己烷使溶解，待净化。 1.3.4 固相萃取净化 按照图2方法进行净化实验，其中丙酮、正己烷溶液配比为5：95（体积比）。收集液再次用MultiVap-8浓缩至近干，用异辛烷定容至1.0 mL，待测。 图2. 弗罗里硅土柱净化方法 1.4样品加标处理 按1.3方法处理样品过程中，在用乙酸乙酯-环己烷（1：1）定容前，往10mL容量瓶中加100μL的1.2方法所配的标准储备液，然后按照1.3.2~1.3.4方法进行实验，实验进行六组，最后用异辛烷定容至1.0 mL，用来测定加标回收率。 1.5 GC/MS检测条件 分析柱：DB-17(30m*0.25mm*0.25μm)；验证柱：DB-1 (30m*0.25mm*0.25μm)；进样口温度：240℃；不分流进样；初始柱流速：1.3mL/min；恒压模式；进样量：1.0μL；柱温：70℃保持1min，以10℃/min升至180℃，保持5min，再以5℃/min升至220℃，最后以100℃/min升至280℃，保持8min。 电子轰击源（EI）；四极杆温度：150℃；离子源温度：230℃；辅助加热温度：290℃；扫描模式：SIM；溶剂延迟时间：10min。 2、实验结果 2.1有机氯标准工作液选择离子流谱图 图3有机氯标准工作液选择离子流谱图 2.2 加标样品的选择离