酶定向进化的研究进展.PDFVIP

第4卷第1期 生物加工过程 Feb．2006 Chinese of · 9 · 2006年2月 Joumal En舀neering Bi叩rocess 酶定向进化的研究进展 罗巅辉，方柏山 (华侨大学 工业生物技术研究所，泉州362021) 摘要：定向进化在改造酶的性质方面已得到广泛应用，各种建立突变库的方法不断涌现。对新近发展的几种突 变技术(如寡核苷酸设计型装配重组技术AD0、非序列同源蛋白重组旺既REC等)进行了简要地介绍与分类。与突 变技术相对应的筛选方法也在逐渐改变和完善，这里仅介绍高通量筛选方面的一些最新进展。 关键词：定向进化；突变库；高通量筛选 中图分类号：Q55 文献标识码：A 文章编号：1672—3678(2006)0l一0009一cr7 R鹤earchin of directedevolution em万瑚陀s UJODiaJl一hui．FANGBai—shan (Institute《IndustIial uIliversit)r，QI培n小ou36202l，CIlim) Biotechnolo舒，Hllaqiao evolutionhas of fe鹊iblemet}l— Abs钉act：Directed usedto tllecharacteristics k．en奶dely chaI]哩-e erl巧me．田1e for ods libraIiessuchasADOandSHIPRECwereintmducedin recentdevel． gene t}lis枷cle；and genemting in screen(}rrS)forenz)硼e discussed． opmentshigh-thmu曲put activ时were words：directed KIey evolution；咖tant screen(HTS) libraq；hi曲一thmu曲put 定向进化作为改造蛋白质的有效手段已被广泛 随机突变与改组属于非理性设计，而区域选择性突 应用。通过定向进化可以使蛋白具备所需的各种性 变属于半理性设计。 质，应用于不同反应过程中。从该领域文章的增加 1．1随机突变 速度可以看出，在过去10a中，该技术已经逐渐渗透 建立突变体库最直接的方式就是随机突变，这 到化工、医药、农业等各个领域，甚至已经成为生物 种方法不需要知道蛋白质的结构信息，能够得到无 研究者的常用工具之一…。 法预知突变位置的有益突变体。易错PCR是其典 型代表。它通过改变传统PcR反应体系中某些组 1定向进化的建库策略