沉积物中多环芳烃降解菌的分离及其包埋固定化颗粒的降解特性研究-环境科学与工程专业论文.docx

摘 要 多环芳烃(Polycyclic Aromatic Hydrocarbons，PAHs)为芳香族、持久性有机化 合物，在空气、水体和土壤/沉积物中广泛分布，对人类的健康和生态环境具有“三 致作用（致癌、致畸、致突变）”，是国际上环境污染物的研究重点化合物之一。 课题针对长江重庆主城重钢旧址区域水体表层沉积物，对 PAHs 特征降解菌进 行了纯化、分离和鉴定；并以海藻酸钠为包埋载体，氯化钙为交联剂，制备了特 征菌的包埋颗粒。研究对比了菲、荧蒽加标沉积物-水体系中，菌悬液和微生物包 埋固定化小球对 PAHs 目标化合物——菲和荧蒽的降解效能，并对包埋颗粒的特性 进行了探讨。实验结果可为 PAHs 在污染沉积物中的生物修复研究提供基础数据与 理论支撑。论文的主要研究内容和结论如下： 首先，论文进行了特征降解菌株的分离、纯化及鉴定分析：通过富集培养、纯 化分离，从沉积物样品中得到 2 株能以菲/荧蒽为碳源和能源的降解菌 S1、S2，对 其进行了显微镜和电子扫描电镜观察、生长曲线测定、系列生理生化鉴定、PCR 扩增、16S rDNA 序列分析及系统发育树的构建等。结合美国国立生物技术信息中 心（National Center for Biotechnology Information，NCBI）信息和相关报道，鉴定 并命名 S1、S2 分别为伪血鞘氨醇单胞菌（Sphingomonas pseudosanguinis strain J1-q） 和克雷伯氏菌属（Klebsiella sp. J2-K），GenBank 登录号分别为：KP216807、 KP216808。 其次，研究了菌悬液对菲和荧蒽加标沉积物-水的降解特性：实验选择致病性 较低的伪血鞘氨醇单胞菌 S1 以及外购于中国工业微生物菌种保藏管理中心的施氏 假单胞菌（S3），开展了 PAHs 降解过程研究。基于两株菌的生长曲线特性，对保 藏的菌株扩大培养，将对数期和稳定期交叉点的菌悬液（10%体积比）转接到菲和 荧蒽加标沉积物-水体系进行降解实验，不同时刻取样测定体系内菲和荧蒽残留浓 度，探讨了实验条件下两菌株的菌悬液对菲和荧蒽的降解特性。经过 40 余天，降 解反应过程达到稳定。结果表明：S1 对菲和荧蒽的降解率分别为 51.18%、43.37%， S3 对菲和荧蒽的降解率分别为 44.75%、37.77%，S1 降解效率高于 S3。 进一步研究了包埋菌株对菲和荧蒽加标沉积物-水体系的降解特性：选择海藻 酸钠为包埋剂、氯化钙为交联剂进行包埋，研究了包埋菌对菲和荧蒽加标沉积物- 水体系的降解。实验经过 49 d，降解反应达到稳定。结果表明，S1 包埋菌对菲和 荧蒽的降解率分别为 69.84%、60.22%，S3 包埋菌对菲和荧蒽的降解率分别为 56.89%、47.96%，两菌株包埋后对菲和荧蒽生物降解效果对比菌悬液有较大的提 高，强化降解效能显著。结合空白实验结果，表明生物强化降解是 PAHs 降解的主 要因素，远远超过挥发、光解、吸附或原环境中的生物降解等自然作用。 最后，对包埋颗粒特性进行了研究：基于驯化前后包埋颗粒密度、弹性、压缩 强度、粘连性、稳定性、传质及包埋率等方法可行性指标的测定，结合扫描电镜 观察，进行了包埋颗粒特性的探讨。结果发现，颗粒内部呈复杂的蜂窝状，空隙 丰富，比表面积较大，可为菌体附着提供充足的空间，增大其吸附能力，加快传 质的速率。新制备颗粒内部外层与中心区域菌量相当，驯化后较之前外层菌体密 度明显大于中心，菌体体积明显增大，说明其可以吸收营养物质进行正常繁殖代 谢，海藻酸钠-氯化钙包埋材料具有良好的传质效果。随驯化时间延长，中心菌体 密度不变甚至有降低的趋势；颗粒尺寸几乎不变，内部网状结构变为疏松，甚至 趋于多个球形相互包含并保持联通的规则状。 PAHs 的生物修复效应的强化是目前国内外环境领域的研究热点之一，在两江 重庆主城区域相关的研究报道甚少，论文研究内容的地域特征显著，并受国家自 然科学基金资助，研究结论对深入探讨 PAHs 污染沉积物的生物修复，以及微生物 包埋强化降解技术的研究应用具有一定的理论意义，可为水—沉积物体系中的 PAHs 的迁移、转化、降解等机制的深度研究提供科学的数据支撑。随着国家“水 十条”的颁布，论文研究结果对于维护三峡库区人群健康和水环境安全亦具有十 分重要的现实意义。 关键词：多环芳烃，沉积物，分离纯化，包埋，生物降解 ABSTRACT Polycyclic Aromatic Hydrocarbons(PAHs), a kind of aromatic persistent organic compounds, is widely distributed in air, water, soil and s