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- 约 81页
- 2018-11-28 发布于上海
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雌鼠不同生殖周期特定脑区突触外GABAA受体表达研究-人体解剖与组织胚胎学专业论文
宁夏医科大学学位论文独创性声明
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宁夏医科大
宁夏医科大学硕士研究生学位论文
中文摘要
I
I
雌鼠不同生殖周期特定脑区突触外 GABAA 受体的表达研究
摘 要
女性生殖周期雌孕激素呈现周期性变化,尤其是妊娠过程和分娩后激素的较 大变化使得女性出现各种各样情绪障碍及各种临床症状。有研究认为,妇女的以 上各类精神疾病均有女性生殖周期雌、孕激素等卵巢甾体激素的波动所引发。这 些临床症状的出现与孕激素对 GABAA 调节系统的作用有关。但体内神经甾体激 素及其中枢神经系统的调控变化与此类抑郁症相关性的认识尚未统一,现有的研 究尚不足以揭示此类疾病发生的实质。对激素与相关情绪变化相关关系的研究, 将对揭示激素与情绪变化的机理提供新的科学依据。本实验以此为出发点,研究 啮齿类动物鼠在不同生殖周期各项指标的变化,分析各组它们血清孕激素含量与 不同脑区突触外 GABAA 受体 δ 亚基的表达的相关性。 第一部分:雌性小鼠不同生殖周期大脑皮层和海马突触外 GABAA 受体的表达研 究
目的 探究雌性小鼠不同动情周期动物行为学的变化,不同生殖周期皮层及海马 突触外 GABAA 受体的表达的变化。
方法 以 6 周龄有完整动情周期雌性 C57BL/6J 小鼠实验对象,采用阴道涂片法, 每天分 8: 00、16:00 和 22:00 三个时间段进行动情周期的鉴别,以精确判断小鼠动 情周期,筛选出具有完整生殖周期的小鼠,确定其每个周期的持续时间。并将其 分为两组,即动情期组与动情间期组;Elisa 检测每组小鼠血清雌孕激素含量;高架 十字迷宫实验观察每组小鼠的行为学变化;免疫组织化学法观察每组小鼠海马突 触外 GABAA 受体 δ 亚基的表达;分析各组小鼠血清孕激素含量与突触外 GABAA 受体 δ 亚基的表达的相关性。
结果 Elisa 结果显示,动情间期组雌鼠血清孕酮含量(12.47±1.89 ng/mL)高于
II
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动情期组(6.02±2.20 ng/mL),而雌激素水平动情间期(157.00±21.30 pg/mL)
低于动情期组(185.48±35.42pg/mL);本研究室使用的小鼠高架十字迷宫实验显 示,动情期组与动情间期组小鼠在高架十字迷宫开臂、闭臂以及中央平台的活动 总的活动时间无明显差异,但是在开臂中小鼠活动的次数和时间,动情间期组高 于 动 情 期 组 , 差 异 具 有 统 计 学 意 义 (P< 0.05 ) ; 免 疫 组 化 结 果 显 示 , 海 马 脑 区 GABAA 受体δ亚基的阳性表达动情间期组(28.93×10-3±4.92×10-3)高于动情期 组(18.89×10-3±3.74×10-3)较强,差异具有统计学意义(P<0.05),大脑皮层 GABAA 受体 δ 亚基阳性表达较强,但动情间期组(39.84×10-3±2.97×10-3)与动 情期组(37.31×10-3±1.13×10-3)无明显差异(P0.05)。动情间期与动情期海马 δ亚基阳性结果 IOD 值与体内孕酮浓度的变化呈显著性相关,相关系数为 r= 0.9924。结论 1.C57BL/6J 小鼠平均动情周期为 5.3 天,小鼠血液雌激素浓度动情 期组高于动情间期组,血液孕酮浓度动情间期组高于动情期组,雌、孕酮在小鼠 体内随卵巢变化呈周期性的变化。2.在小鼠生理状况下,不同生殖周期雌孕激素水 平会发生波动,进而影响 GABAA 受体δ亚基在不同生殖周期特定脑区的表达。 海马脑区突触外 GABAA 受体δ亚基的表达在动情期低,而动情间期高,且突触外 δ亚基的表达随孕酮浓度的增高而加强,两者呈线性相关。3.大脑皮层突触外 GABAA 受体δ亚基的表达在动情间期与动情期无明显差异。4.行为学实验显示: 动情
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