成纤维细胞在甲状腺疾病中的作用研究-内科学(内分泌代谢病)专业论文.docxVIP

III IV 成纤维细胞在甲状腺疾病中的作用研究 摘 要 背景： 成纤维细胞是人体最多的间质细胞，构成了各组织微环境的主体。生理情况下， 成纤维细胞提供结构支持，在组织受损时填充受损组织，并通过分泌细胞因子及趋 化、黏附因子调控炎症反应，从而促进组织修复。但在自身免疫性疾病及肿瘤性疾 病中，成纤维细胞可以持续活化，导致免疫细胞持续浸润并发挥促癌作用。近年来 研究还发现，成纤维细胞还可以影响药物治疗的疗效。在甲状腺疾病中，既往研究 发现成纤维细胞既是甲状腺相关眼病（GO）的效应细胞，而甲癌中也存在成纤维细 胞增生，但研究相对较少。 目的： 探讨成纤维细胞在两种甲状腺疾病中的作用及临床应用价值。在Graves眼病 （GO）中，我们探究成纤维细胞在糖皮质激素(GC)疗效反应中的作用以及相关调控 分子的临床预测价值。在甲状腺良恶性结节中，我们研究结节不同部位的成纤维细 胞对于肿瘤的促进作用，为临床治疗提供依据。 方法： 在 Graves 眼病实验中，分离得到患者的眶后成纤维细胞（OF），在高度炎症环境 刺激下评估其对地塞米松（Dex）的敏感性，继而在临床激素治疗有效和无效的患者 的血清中筛选出候选 microRNA，体外实验评估其调控 OF 对 Dex 作用的影响，并在 临床患者血清中验证该 microRNA 作为治疗前评估激素治疗抵抗的预测价值。 在甲状腺良恶性结节实验中，在临床标本中分析成纤维细胞染色与良恶性、临 床分期的相关性。分离得到良恶性结节及结节旁的成纤维细胞，探讨其表面标志物 V 在良恶性结节中的异同。体外实验建立肿瘤细胞和成纤维细胞间接共培养模型，体 内实验建立直接共培养模型，评估不同部位的成纤维细胞对于肿瘤形成及侵袭、转 移的促进作用。 结果： 在体外高度炎症环境下，GO 的主要致病细胞 OF 直接对 GC 产生抵抗（Dex 抑 制率从 69%降至 28%，p＜0.01），而 miR-885-5p 和 miR-224-5p 可以恢复其敏感性(Dex 抑制率 28% vs. 60%, p=0.03)。GO 患者治疗前的基线血清 miR-885-5p 水平（p=0.03） 和眼裂宽度（p=0.036）是 GC 治疗不敏感的独立危险因素。基线血清 miR-885-5p、 miR-224-5p、TRAb 和眼裂宽度一起构成的模型可以有效预测对于 GC 治疗不敏感的 患者（NPV=100%）。 恶性甲状腺结节的成纤维细胞多于良性结节（11450±1022 VS. 3624±871.2，p ＜0.0001），而在甲状腺乳头状癌中活化成纤维细胞染色和临床分期直接正相关（I、 II 期 vs. III、IV 期，p=0.001）。在体外实验中，肿瘤相关成纤维细胞(CAF)、癌旁成 纤维细胞(NAF)都具有促进肿瘤增殖的能力（2.5-4 倍，p＜0.0001），而仅 NAF 显著 促进肿瘤的侵袭（1.5 倍，p＜0.01）。体内实验证实成纤维细胞促进成瘤（p=0.03）、 侵袭和转移（6/22 只 vs 2/8 只）,且 NAF 比 CAF、结节性甲状腺肿来源成纤维细胞 (GAF)作用更强。 结论： miR-885-5p、miR-224-5p 可以恢复 GO 对激素的敏感性，治疗前循环 miR-885-5p、 miR-224-5p 加上 TRAb 和眼裂宽度作为标志物组合，可以预测 GO 患者的激素反应 (NPV=100%)。 成纤维细胞参与甲癌的发生发展。NAF 具有比 CAF 更强的促进甲状腺癌发生发 展的能力，而 GAF 也有促进肿瘤的能力，提示对于甲状腺结节的术式选择需要谨慎。 关键词： 眶 后 成 纤 维 细 胞 、 糖 皮 质 激 素 、 mi cro RNA 、 肿 瘤 相 关 成 纤 维细胞、甲状腺结 节、甲状腺乳头状 癌 VI Role of Fibroblast in Thyroid Diseases Abstracts Context: As the most abundant stromal cells in human, fibroblast provide supports to the structure integrity of tissue. It refills the tissue to fix the damage via secretion of cytokines, chemokines and adhesion molecules. However, in autoimmune and tumor diseases, fibroblast sustains its activation, leading to co