综合征合并桥本氏甲状腺炎临床及分子遗传学分析.docx

山西医科大学硕士学位论文 山西医科大学硕士学位论文 PAGE PAGE 1 1 例 Prader-Willi 综合征合并桥本氏甲状腺炎临床及分子遗传学研究 前 言 Prader-Willi 综合征（Prader-Willi syndrome, PWS）是临床上最常见的以肥胖和矮小为 特征的遗传综合征，1956 年由 prader 首先报到，其后国内外陆续有病例报道，其发病率在 1:10,000～1:15,000[1]，无性别差异，多为散发病例。临床表现主要分两个阶段：新生儿期 的肌张力低下、吸吮无力、喂养困难、少哭少动和儿童期的过度饮食、肥胖、矮小、性腺 发育障碍等，它是与生长发育及内分泌系统有关的临床综合征[2, 3]。近 30 年来，国内外对 其进行了大量的研究，发现其临床表现与下丘脑功能障碍有关，内分泌方面最常见生长激 素和性激素缺乏，但就甲状腺是否受影响，国外尚存在争论，2007 年 Butler 等[4]报道 PWS 患者和普通人群甲状腺功能低下的患病率相近。而 2010 年 Vaiani 等[5]报道 20%-30%的 PWS 患者伴有中枢性甲状腺功能低下。对此，国内少有报道。 桥本 氏 甲状腺炎 (Hashimoto thyroiditis) 又名 慢性淋巴细胞性甲状腺炎 (chronic lymphocytic thyroiditis)，是一种自身免疫性疾病，病 程中可从患者血清中 检出效价很高 的抗甲状腺各 种成分的自身抗体 。多见于 30～50 岁女性，表现为甲状 腺肿，甲状腺 功能初期时正 常，病程中有时可 出现甲状腺功能亢进 ，也可出现甲状腺功能减退 。临 床可分 为 8 型 ，青少年型表现为 甲状腺肿大不明显，甲状腺功能正常，甲状腺抗体滴 度又较低 ，临床诊断较困难 ，部分患者可合并 甲状腺功能减退。 我们在临床上遇到 1 例 Prader-Willi 综合征患者，且合并有桥本氏甲状腺炎。 PWS 是一种与基因组印迹(genomic imprinting)有关的非孟德尔遗传性疾病[6]，涉及到 表观遗传学(epigenetic phenomenon)，即只改变了基因组的结构而不改变基因组序列， 也 是首个被证实由母源同源二体(uniparental disomy, UPD)而致的疾病[7]。近年来国外对该病 的分子遗传学基础进行了大量研究，发现其与染色体 15q11-13 区域的一组印迹基因有关， 这些印迹基因的启动子区含有大量的 CpG 岛，甲基化后失去表达，因此甲基化状态决定这 些印迹基因等位基因的表达[6,8]。这些印迹基因有些只有母源等位基因表达，有些只有父源 等位基因表达。正常情况下，与 PWS 有关的印迹基因，母源等位基因甲基化失去表达， 父源等位基因非甲基化正常表达，而当父源等位基因由于 15q11-13 区域基因缺失(deletion)、 UPD 或基因印迹缺陷(imprinting defects)而表达障碍时，就导致了 PWS 的发生。因此 PWS 是基因甲基化疾病的典型代表。 自九十年代起国外及国内专家应用多种方法来进行其分子遗传学诊断，先后应用了高 分辨染色体技术、荧光原位杂交(flunorence in situ hybridization, FISH) [9]、DNA 甲基化分析 等。这些方法各有利弊，高分辨染色体技术多用于基层，操作简单。荧光原位杂交由于该 方法操作复杂、费用昂贵，不易在临床推广而只应用于实验室的基础研究。就检测范围来 说，高分辨染色体技术可检测大的缺失或染色体异常，检测率约 60%，FISH 可检测微小 缺失，检测率约 70%。而 DNA 甲基化方法可检测微小缺失、印迹缺陷和 UPD，检测率约 99%。 DNA 甲基化检测方法是根据染色体 15q11-13 区域某些父源和母源等位基因不同的甲 基化状态，检测父源和母源等位基因不同表达情况的一种新方法。刚开始时应用 Southtrn blotting[10,11]分析这种情况，但由于该方法需要 DNA 量多、需要使用同位素、操作繁琐， 而渐渐被甲基化特异性 PCR(methylation-specific PCR, MS-PCR) [8, 10, 11]替代，该方法实验原 理：DNA 经亚硫酸氢钠修饰处理后甲基化的胞嘧啶不变，而所有非甲基化的胞嘧啶变为尿 嘧啶，这样等位基因不同的甲基化状态通过基因序列的不同得以鉴别。MS-PCR 是近年来 研究比较热的一种方法，在国外该方法得到了普遍的推广，国内北京、上海对该方法也进 行了研究。它的特点是：(1)检测范围广，可检测微小缺失、印迹缺陷和 UPD，检测率约 99%；(2)所需 DNA 量少，设备要求简单，所需时间短；(3)特异性和敏感性具佳的诊断方 法。