罗布麻叶顶空气相色谱质谱指纹图谱的研究.docVIP

罗布麻叶顶空气相色谱一质谱指纹图谱的研宄 ：相淞华，宋建平，刘训红，张月婵 】 目的】建立罗布麻叶挥发性成分顶空气相色 谱一质谱（HSGC MS）指纹图谱分析方法，评价不同产地 罗布麻叶药材的质量。 方法】采用HSGC MS联用技术对 不同产地罗布麻叶的挥发性成分进行分析，测定其指纹图谱， 确定共有指纹峰，并作模糊聚类分析和相似度评价。 结果】 罗布麻叶挥发性成分中含有14个特征性指标成分，初步建 立了以此1 4个共有峰为特征指纹信息的HSGC MS指纹图 谱。 结论】本方法准确可靠，重复性好，可作为罗布麻叶质 量评价的依据。 关键词】罗布麻叶/化学；挥发性成分/分析；指纹 图谱 罗布麻叶为《中国药典》收载的常用中药，系夹竹桃科 植物罗布麻Apoc ynumveneto mL.的干燥叶，具有平肝安神、 清热利水之功效［1］。现代用于治疗高血压、高血脂、冠 心病、哮喘、气管炎等疾病有较好的效果［2］。罗布麻叶 挥发性成分为主要活性成分之一，如芳樟醇有镇静、降血压、 抗菌等作用［3］，薄荷酮和胡薄荷酮有解热、镇痛、抗炎 作用［4］，藏红花醛有较强的抗癌活性［5 ］，氧化石竹烯 有平喘、镇静、抗癌作用，1 a 萜品醇有显著平喘功效 [6]，但尚未见有关罗布麻叶挥发油指纹图谱研究的报 道。本研究采用顶空气相色谱一质谱（HSGC MS）联用技 术对不同产地罗布麻叶的挥发性成分进行分析，现报道如 下。 1仪器与试药 Agilent68 90/5975B型气一质联用分析仪，工作 站，AgilentG 1888顶空自动进样器（美国安捷伦仪器公 司），NIST05标准质谱检索库。 罗布麻叶各产地样品为实地采集或由当地药材公司提 供，编号为：S1 江西，S2 安徽，S3 吉林，S4 山东，S5 山西，S6 江苏，S7 新疆，S8 河北，S9 内蒙古，S10 天津，S11 辽宁，S12 陕西。均经研宄者鉴定为夹竹桃 科植物罗布麻Apocynumv enetomL.的叶。留样凭证存放于 南京中医药大学中药鉴定实验室。 2方法与结果 分析条件 色谱条件色谱柱：HP 5MS（涂布浓度为5%的苯甲基聚 硅氧烷弹性石英毛细管柱，mX 250 umX u m）；进样口温度: 180°C；程序升温：50°C保持20m in,以4°C/min的速率升 至200°C，保持5min；载气：He气，流量：mL/min，分流比 15 : 1。 质谱条件电离方式：电子轰击离子源（EI）;离子源温 度：230°C，四级杆温度：150°C，接口温度：280°C；电子倍 增器电压：IV;电子能量:70eV;扫描范围：aumo 顶空供试品制备 通过对药材粉碎粒度、体积装样量、顶空加热温度及 顶空加热时间进行考察，确定罗布麻叶挥发性成分优化的顶 空条件：取罗布麻叶粉末(过40目筛)3g，精密称定，置顶空 瓶中，密封，放入顶空进样器，12 0°C加热平衡30mi n,供测试 方法学考 h记录图取罗布麻叶挥发性成分进样分析，结果表明： 60?120min无出峰，提示50min内挥发性成分出峰完全。 精密度试验取罗布麻叶(S2)挥发性成分进行分析，连续 进样5次。结果表明：14个指标成分群保留时间的相对标 准偏差均小于%，相对含量的相对标准偏差均小于5%,提示仪 器精密度良好。 稳定性试验取罗布麻叶(S2)挥发性成分进行分析，分别 在1、3、6、24、48、12 Oh进样6次，得14个主要特征峰 保留时间、相对含量。结果表明：14个指标成分群保留时 间相对标准偏差均小于％:相对含量的相对标准偏差均小于 5%,提示120h内样品(溶液)稳定性较好。 重复性试验取同一批次罗布麻叶(S2) 5份，提取挥发性 成分后分别进样分析，得1 4个主要特征峰的保留时间和相 对含量。结果表明：14个指标成分群保留时间的相对标准 偏差为0%?%，相对含量的相对标准偏差为%?%，说明重复性 较好。 指纹图谱建立 样品按选定的顶空条件及分析条件进行分析，测得所有 供试品的气相色谱一质谱（GC MS）总离子流图；再对总 离子流图中的各峰经质谱扫描后得质谱图，所有组分质谱数 据经计算机处理和NISTO 5标准质谱图库检索鉴定，并与有 关标准谱图核对，初步确定出罗布麻叶挥发性成分中53种 化合物。根据罗布麻叶挥发性成分HSGC MS总离子流E 所给出的峰数高、峰保留时间和峰面积值等相关参数以及 成分鉴定结果，进行分析、比较，制定HSGC MS指纹图谱 1，见彩图页第666页）。 指纹图谱分析 共有指纹峰的标定经对挥发性成分G C MS总离子流 的分析、比较，罗布麻叶标定14个共有峰作为指纹图谱 的特征峰，1?14号峰化学成分依次为：2 戊烯 1 醇 未鉴定、1，2, 5, 5 四甲基1，3 环戊二烯、3, 5