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分子标记技术在西花蓟马研究中应用进展 　　摘要：西花蓟马是一种危险性较强的外来入侵害虫，对我国的农业经济以及生物多样性都造成了极大的损失和威胁。本文概述了分子标记技术在西花蓟马的种类鉴定、种群分化、原产地、传播模式、检测其捕食天敌的效能和携带番茄斑萎病毒(TSWV)等方面的应用，并做了前景展望。 　　关键词：西花蓟马；分子标记；种类鉴定；种群分化；传播模式；TSWV 　　中图分类号：S433.89　文献标识号：A　文章编号：1001-4942(2012)01-0099-05 　　西花蓟马(Frankliniella occidentalis)属缨翅目(Thysanoptera)、蓟马科(Thripidae)，是一种世界性入侵害虫。该虫原产于美国西部地区，自20世纪80年代后，迅速向外扩散，2003年首次在北京发现，目前该虫分布遍及全球各大洲。在我国。北京、云南、浙江、山东、贵州和江苏等省市都已有分布和为害的相关报道。西花蓟马具有极端多食性，不仅本身对农作物危害极大，并且还可以传播番茄斑萎病毒属(Tospovirus)等多属的植物病毒，造成更严重的损失。西花蓟马不仅对世界经济造成了极大损失，而且对入侵地的生物多样性构成了巨大的威胁，因此各国学者对其早已展开了多方面深入的研究。从20世纪80年代开始，由于分子生物学的飞速发展，出现了多种多样的分子标记技术。分子遗传标记突破了表达型标记的局限性，其变异只来源于基因DNA序列的差异，具有稳定性高、受环境条件的影响较小、信息含量高、不同层次和类群之间广泛可比等优越性，因而成为遗传标记中又一强有力的工具，在揭示物种的遗传变异性研究中发挥着独特的优势。分子标记的发展对西花蓟马的研究提供了强有力的技术支持。 　　分子标记技术目前已出现了几十种，新的分子标记还会不断涌现。昆虫研究常用的一些分子标记方法有，以Southern杂交为基础的限制性内切酶酶切片段长度多态性(restriction fragmentlength polymorphism，RFLP)和DNA指纹谱；以PCR为基础的随机扩增片段长度多态性(randomamplified polymorphic DNA，RAPD)、DNA扩增指纹分析(DNA amplification fingerprinting，DAF)、重复序列引物扩增(simple repeat sequence primer-PCR，SRSP-PCR)、扩增片段长度多态性(ampli-fied fragmemt length polymorphism，AFLP)、单链构象多态性PCR(single-strand conformation poly-morphism-PCR，SSCP-PCR)；以重复序列为基础的简单重复序列即微卫星DNA标记(simplesequence repeat，SSR)；以mRNA为基础的mRNA差别显示反转录PCR(mRNA differential displayreverse transcription polymerase chain reaction，DDRT-PCR)、DNA测序(DNA sequencing)以及单核苷酸多态性(Single nucleotide polymor-phism，SNP)。本文概述了分子标记技术在西花蓟马研究中的应用情况，并对其应用前景做了展望。 　　1.分子标记在西花蓟马研究中的应用 　　1.1西花蓟马分子鉴定的研究 　　西花蓟马是一种危险性较强的外来人侵害虫，对于它的鉴定和分类工作显得尤为重要。西花蓟马的成虫在形态上具有明显的特征，在显微镜下可以将其与其它近似种区别，但对于一些残体、幼虫以及无法从形态上辨别的虫体，利用分子标记技术可以准确、快速地鉴定。国内外学者在这方面已经做了大量的工作。Moritz等(2000)采用内转录间隔区(internal transcribedspacer，ITS)――限制片段长度多态性(ITS-RFLP)的方法，成功地将西花蓟马和美棘蓟马(Echinothrips americanus Morgan)区分开；Toda和Komazaki(2002)采用ITS2-RFLP法鉴别日本果树上常见的9种蓟马(包括西花蓟马)的成虫和幼虫；Brunner等(2002)根据mtCO I-433bp的扩增产物，结合测序和扩增产物RFLP分析，有效区分了西花蓟马、烟蓟马(Thrips tabaciLindeman)和棕榈蓟马(Thrips palmi Karny)；林峻贤等(2003)则基于28S rDNA和16S rDNA探讨Multiplex-PCR及PCR-RFLP鉴定西花蓟马和烟蓟马的可行性。采用PCR产物直接测序法，游中华等(2007)对包括西花蓟马在内的9种蓟