球兰种质资源遗传多样性的ISSR分析及组培技术初步的研究.pdfVIP

目 录 缩 写 词i 摘 要 I 关键词 II AbstractIII Key words V 第一章 引 言1 1 萝摩科植物种质资源研究1 1.1 特征1 1.2.1 国内萝摩科植物的应用1 1.2.2 国外萝摩科植物的应用2 1.3 萝摩科植物分布情况3 2 球兰属植物概述4 2.1 球兰属植物概述4 2.2 球兰的应用4 3 植物 DNA 分子标记分析6 3.1 ISSR 分子标记技术及其应用 6 3.2 AFLP 分子标记技术及其应用7 3.3 SRAP 分子标记技术及其应用8 3.4 RAPD 分子标记技术及其应用 8 4 萝摩科植物离体快繁技术研究进展8 4.1 外植体的选择9 4.2 植物激素的选择9 4.3 培养条件10 4.4 植物组织培养存在的问题10 4.4.1 污染问题 11 4.4.2 外植体褐变问题11 4.4.3 试管苗玻璃化问题12 5 本研究的目的意义12 5.1 目的意义12 5.2 主要内容13 第二章 43 份球兰种质资源遗传多样性的 ISSR 分析14 1 材料与方法14 1.1 材料14 1.1.1 试验材料 14 1.2 试剂与设备17 1.3 试验方法17 1.3.1 球兰基因组 DNA 提取 17 1.3.2 ISSR-PCR 17 1.3.3 数据统计与分析18 2 结果与分析18 2.1 球兰基因组 DNA 质量及浓度检测 18 2.2 球兰种质资源遗传多态性分析21 2.3 球兰种质资源遗传相似系数分析22 2.4 球兰种质资源遗传聚类分析27 3 讨论28 3.1 43 份球兰种质资源具有丰富的遗传多样性28 3.2 地理隔离是球兰种质资源遗传多样性重要影响因素28 第三章 球兰组织培养技术初步研究30 1 材料与方法30 1.1 材料30 1.2 方法30 1.2.1 愈伤组织诱导30 1.2.2 愈伤组织增殖30 1.2.3 愈伤组织的分化31 1.3 培养条件31 1.4 数据统计31 2 结果与分析31 2.1 心叶球兰叶片愈伤组织的诱导培养31 2.2 不同浓度的 6-BA、NAA 或 2,4-D 对心叶球兰愈伤组织增殖的影响 31 2.2.1 不同浓度 6-BA 对心叶球兰愈伤组织增殖的影响 31 2.2.2 不同浓度的 NAA 对愈伤组织增殖的影响 33 2.2.3 不同浓度的 2,4-D 对愈伤组织增殖的影响35 2.3 心叶球兰愈伤组织的分化37 2.3.1 不同浓度的 KT 对愈伤组织分化的影响37 3 讨论39 3.1 适宜浓度的生长素和细胞分裂素对心叶球兰愈伤组织增殖有显著的促进作用 39 3.2 球兰愈伤组织培养可进一步用于工业化生产球兰特有的药用成分 40 3.3 心叶球兰愈伤组织易于分化根40 第四章 小 结42 1 43 份球兰种质资源遗传多样性的 ISSR 分析 42 2 球兰组织培养技术初步研究43 参考文献45 附录：图版及说明50 图版I 43 种球兰属植物形态 50 图版II 43 种球兰属植物 ISSR 凝胶电泳图谱65 图版III 球兰愈伤组织诱导、增殖与分化71 缩 写 词 缩写词 英文全称 中文名称 6-BA 6-benzylamino purine 6-苄氨基腺嘌呤 GA Gibberellin 赤霉素 min Minute 分钟 MS Murashige and Skoog