枫杨总醌体外、体内抗菌作用及抗菌醌衍生物的合成研究-药物化学专业论文.docx

枫杨总醌体外、体内抗菌作用 及抗菌醌衍生物的合成研究 中文摘要 目的 ：获得枫杨抗菌总醌的制备工艺，研究枫杨总醌的体外、体内抗 菌作用，为研制枫杨总醌抗菌中药奠定基础；同时对个别抗菌醌进行氨基酸 衍生合成研究，改善抗菌活性或发现醌上某些特殊抗菌活性结构位点或取代 基团。 方法：通过四种提取方式获得枫杨总醌提取物：氯仿萃取粗总醌、石 油醚萃取粗总醌、氯仿萃取后碱溶酸精制总醌、石油醚萃取后碱溶酸沉精制 总醌。碱溶酸沉工艺：分别用 5%的氢氧化钠溶液、5%的碳酸钠溶液、5%的 碳酸氢钠溶液、5%的氨水溶液碱溶萃取出来后再分别用浓盐酸处理得到提取 物。体外抗菌实验：以左氧氟沙星和阿奇霉素为对照，采用琼脂平板法测定 其抗菌谱，用试管二倍稀释法测定最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度 （MBC）；体内抗菌实验：药物组给小鼠灌胃给药 3d，第 4 天腹腔分别注射 金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等 8 种菌液进行感染，继续给药至第 7d，观察感 染后 7d 内各组小鼠死亡情况。抗菌醌衍生物的合成：在大黄酸蒽醌羧基接上 不同的取代基：甘氨酸，丙氨酸，苯丙氨酸，缬氨酸，亮氨酸，异亮氨酸， 得到的合成产物；测定其抗菌的作用：以左氧氟沙星和大黄酸为对照，用琼 脂平板法测定其抗菌谱，用试管二倍稀释法测定最低抑菌浓度（MIC）和最 低杀菌浓度（MBC）。 结果：研究表明枫杨氯仿萃取粗总醌、石油醚萃取粗总醌、氯仿萃取 后碱溶酸精制总醌、石油醚萃取后碱溶酸沉精制总醌都有抗菌作用，氯仿萃 取粗总醌及氯仿萃取后碱溶酸沉精制总醌的抗菌谱广，石油醚萃取总醌对金 黄酸葡萄菌和绿脓杆菌无作用。用不同碱处理得到的提取物对抗菌谱没有影 响。抗菌活性强度（MIC、MBC）氯仿萃取后碱溶酸精制总醌抗菌强度近似 于左氧氟沙星，石油醚萃取总醌较差。在体内抗感染治疗中，4 种不同提取 方式的总醌对 8 种致病菌腹腔感染小鼠均具有良好的治疗作用，在剂量为 50mg Kg-1 的死亡率低于 50%，其抗感染疗效与左氧氟沙星、阿奇霉素接近。 合成了 6 个大黄酸-氨基酸衍生物，并进行了精确的结构表征。测定衍生物的 抗菌作用表明：多数衍生物的抗菌作用比大黄酸弱，其中大黄酰甘氨酸 甲酯的抗菌作用最差，大黄酰缬氨酸甲酯和大黄酰亮氨酸甲酯较强。 结论：枫杨的氯仿萃取总醌具有良好的体外、体内抗菌作用，其活性 高于石油醚萃取总醌；同时经碱溶酸沉精制后得到的氯仿总醌活性明显高于 非精制总醌。可见枫杨总醌具有良好的抗菌开发价值，该研究为研制枫杨总 醌抗菌中药奠定了基础。在抗菌醌衍生物的合成研究中，合成的产物都对抗 菌有一定的作用，不同取代基对抗菌的影响作用不同，大黄酸的羧基对抗 菌具有重要作用，被取代后会导致抗菌作用减弱，提示大黄酸的抗菌作 用不仅来自蒽醌母核，也与其取代羧基有密切关系，这为后续开展大黄 酸抗菌构效关系研究提供了参考。 关键词：枫杨总醌，抗菌活性，体内，体外，合成，大黄酸氨基酸衍生 物 Study on antibacterial effect (in vitro and in vivo) of quinines from Pterocarya stenoptera and synthesis of antibacterial quinone derivatives ABSTRACT Objective: Preparation of antimicrobial total quinone get pterocarya stenoptera total quinone in vitro studies, in vivo antibacterial activity for the development of antibacterial medicine pterocarya stenoptera total quinone foundation; while the individual amino acid synthesis of antimicrobial quinone derivative, improve or find some special antibacterial activity of antibacterial activity of quinone structure on site or substituent groups. Methods: The total quinone extract obtained by extraction of four ways: total quinone maple chloroform extraction of crude petroleum ether extract crude total quinone, th