肝癌肝移植术后肿瘤复发与肝再生关系的实验研究-临床医学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取 得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不 包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志 对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定， 即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用 影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有 关部门或机构送交论文，并编入有关数据库。 保密 ，在 年解密后适用本授权书。 本论文属于  不保密 。 （请在相对应的方框内打“√” ） 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 导 师 签 名 ： 日期： 年 月 日 天津医科大学硕士学位论文 天津医科大学硕士学位论文 中文摘要 目的：探讨肝癌肝移植术后肝再生过程对肿瘤复发的影响及其可能的发生 机制。 方法：SPF 级健康成年雌性 Wistar 大鼠 18 只，8-10 周龄，体重 200-230g， 采用随机数字表法随机分为 3 组，H0 组：大鼠行开腹并充分游离肝脏周围韧带 后经门静脉注射 Walker 256 肿瘤细胞悬液 0.5ml（约 5.0×105 个）；H30 组：切 除大鼠肝脏约 30%后经门静脉注射 Walker 256 肿瘤细胞悬液 0.5ml；H70 组：切 除大鼠肝脏约 70%后经门静脉注射 Walker 256 肿瘤细胞悬液 0.5ml，术后经皮下 注射 FK506 模拟肝移植术后免疫抑制状态。比较不同比例肝切组术后 3 周肿瘤 复发率、大鼠体重变化、荷瘤肝重、荷瘤肝体质量比等一般观察指标判断肝再 生过程对肿瘤复发的影响。光镜下观察瘤肝组织病理学切片，Western Blot 测定 肿瘤组织 CAPNS-1 表达水平，免疫组化染色测定肿瘤组织 PCNA 指数，进一步 判断肿瘤组织侵袭性。应用 Western Blot、RT-PCR 分别检测 c-met、VEGFR-2 蛋白和 mRNA 表达水平，判断 c-met、VEGFR-2 的表达是否与肿瘤组织的侵袭、 浸润存在相关性。 结果：术后 3 周各实验组大鼠均存活，且均在肝脏内发现转移性肿瘤结节， 各实验组肿瘤复发率比较无差异。与 H0、H30 组相比，H70 组肿瘤组织表现出 更高的侵袭性与恶性潜能，HE 染色示 H70 组肝组织内弥漫性分布的肿瘤细胞团 灶，术后 3 周 H70 组大鼠体重变化、荷瘤肝重、荷瘤肝体质量比明显高于 H0、 H30 组（P0.05）。与 H0、H30 组相比，Western Blot 示 H70 组肿瘤组织中 CAPNS-1 表达明显增加（P0.05），免疫组化染色示 H70 组肿瘤组织 PCNA 指数明显升 高（P0.05）。Western Blot、RT-PCR 分别示 H70 组肿瘤组织中 c-met、VEGFR-2 的蛋白和 mRNA 表达明显增加（P0.05），且 c-met、VEGFR-2 的表达分别与大 鼠体重变化、荷瘤肝重、荷瘤肝体质量比、CAPNS-1 表达之间存在明显相关性。 结论：肝癌肝移植术后肝再生过程可促进肿瘤组织的生长与恶性转换，其 原因可能与肝再生过程中释放的再生因子有关。 关键词：肝移植 肿瘤复发 肝细胞肝癌 肝再生 I Abstract Objective: To investigate the effect of liver regeneration on tumor recurrence after liver transplantation. Methods: Eighteen healthy adult female Wistar rats were randomly divided into three groups. A suspension of Walker 256 tumor cells in a phosphate buffered solution was prepared at a concentration of 1.0×106 cells/ml before injection. H0 group: The abdominal cavity was entered through a midline incision, and the liver was freed from its ligamentous attachments. The portal vein was injected with 5.0×105 tumor cell