改良细胞因子鸡尾酒法对树突状细胞诱导的研究-临床检验诊断学专业论文.docx

安徽医 安徽医科大学硕士学位论文 PAGE PAGE 10 英 文 缩 略 词 表 英文缩写 英文全称 中文全称 APC antigen presenting cell 抗原提呈细胞 CCR7 chemokine receptor 7 趋化因子受体 7 CD cluster of differentiation 分化簇 CpG ODN cytosine phosphate guanine oligodeooxynucleotide 含 CPG 基序的寡核苷酸 CTL cytotoxic T lymphocyte 细胞毒性 T 淋巴细胞 DC dendritic cell 树突状细胞 ddH2O double distillated water 双蒸水 DEPC diethylpyrocarbonate 焦碳酸二乙酯 DMSO dimethyl suphoxide 二甲基亚砜 EDTA ethylenediamine tetraacetate 乙二胺四乙酸 ELISA enzyme-linked immunosorbent assay 酶联免疫吸附法 FBS fetal bovine serum 胎牛血清 FCM flow cytometry 流式细胞术 Fig figure 图 FITC fluorescein isothiocyanate 异硫氰酸荧光素 FITC-Dextran fluorescein isothiocyanate-Dextran 异硫氰酸荧光素标记的葡 聚糖 G-CSF granulocyte colony stimulating factor 粒细胞集落刺激因子 GM-CSF Granulocyte-macrophage colony stimulating factor 粒-巨噬细胞集落刺激因子 HLA Human leucocyte antigen 人类白细胞抗原 IL interleukin 白介素 MLR mixed lymphocyte reaction 混合淋巴细胞反应 MTT 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5- diphenyltetrazolium bromide 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2， 5-二苯基四氮唑溴盐 ng nanogram 纳克 PBMC peripheral blood monouclear cell 外周血单个核细胞 PBS phosphate-buffered saline 磷酸盐缓冲溶液 PBSCT peripheral blood stem cell transplantation 外周血干细胞移植 PE phycoerythrin 藻红蛋白 PGE2 ProstaglandinE2 前列腺素 E2 polyI:C polyinosinic polycytidylic acid 聚肌苷酸胞苷酸 rpm revolutions per minute 每分钟转数 SI stimulation index 刺激指数 Tab table 表格 TGF-β transforming growth factor-β 转化生长因子-β TNF-α tumor necrosis-alpla 肿瘤坏死因子-α TPS Tissue Polypeptide Specific Antigen 组织特异性多肽抗原 改良细胞因子鸡尾酒法对树突状细胞诱导 的研究 摘 要 目的：探讨优化人 γhG-CSF 动员的外周血采集物来源的树突状细胞（dendritic cell， DC）成熟诱导条件，以便制备更有效的 DC 疫苗应用于临床，观察并比较不同诱 导条件下制备的 DC 疫苗在体外特异性抗肿瘤免疫反应的能力。 方法：利用密度梯度离心法从重组人粒细胞集落刺激因子（γhG-CSF）动员的外周 血采集物分离出单个核细胞，以重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(γhGM- CSF) 和重组人白细胞介素-4(γhIL-4)体外诱导成不成熟树突状细胞（imDC），分别采用 传统细胞因子鸡尾酒（IL-1β、IL-6、TNF-α、PGE2）和改良细胞因子鸡尾酒（IL-1β、 IL-6、TNF-α、polyI:C、CpG ODN）刺激成熟，并设有对照组（只加 IL-4、GM- CSF）。 3d 后收获成熟 DC，观察细胞形态、流式细胞仪检测 DC 的内吞能力通过异硫氰酸 荧光素标记的葡聚糖（FITC-Dextran）、检测 DC 表面 CD83、CD1a、CD80、HLA-DR、 CD86 和 CCR-7，酶联免疫吸附法（ELISA）检测其 IL-12、IL-10 的分泌，MTT 法检测其刺激淋巴细胞增殖能力。实验中三组 DC 分别转染 A549 细胞的总