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肺炎链球菌糖代谢蛋白CcpA对荚膜多糖的调控研究-临床检验诊断学专业论文
万方数据
万方数据
4.讨论 19
第二部分 肺炎链球菌 CcpA 蛋白对 CPS 的调控作用研究 21
1.实验材料 21
1.1 菌株和质粒 21
1.2 实验试剂 22
1.3 主要仪器 24
2.实验方法 24
ccpA 缺失株 D39△ccpA 的构建与鉴定 24
ccpA 回复株(D39ΔccpA::ccpA)的构建与鉴定 26
2.3 荚膜多糖含量检测 26
2.4 实时荧光定量 PCR 27
2.5 统计方法 27
3.实验结果 27
ccpA 缺失株(D39△ccpA)的构建与鉴定 27
成功构建 ccpA 回复株(D39ΔccpA::ccpA) 35
3.3ccpA 基因缺失或回复表达后,细菌 CPS 含量的变化 35
4.讨论 37
全文总结 39
参考文献 40
文献综述 43
肺炎链球菌荚膜多糖的研究现状及 CcpA 对细菌的调控研究 43
致谢 51
攻读硕士学位期间发表的学术论文题录 52
重庆医科
重庆医科大学硕士研究生学位论文
英汉缩略语名词对照
英文缩写
AP
英文全称
Ammonium persulfate
中文全称
过硫酸铵
bp
base pair
碱基对
BSA
Bovine Serum Albumin
牛血清白蛋白
CPS
Capsular polycchareds
荚膜多糖
CSP
Competence-stimulating peptide
感受态刺激因子
DNA
Deoxyribonucleic acid
脱氧核糖核酸
dNTP
Deoxyribonucleosidetriphosphate
脱氧核糖三磷酸
ddH2O
Double distilled water
双蒸水
DOC
Deoxycholate sodium
脱氧胆汁酸盐
ELISA
Enzyme-linked immunoadsorbent assay
酶联免疫吸附试验
EMSA
electrophoretic mobility shift assays
电泳迁移率试验
ELC
chemolyminescence
增强化学发光法
GFP
Green Fluorescent Protein
绿色荧光蛋白
HRP
Horseradish peroxidase
辣根过氧化物酶
IPTG
Isopropyl β-D-1-Thiogalactopyranoside
异 丙 基 硫 代 半 乳 糖
苷
kDa
Kilodalton
千道尔顿
LB
Luria-Bertani medium
LB 培养基
min
minute(s)
分钟
ml
Ni2+-NTA
milliliter
nickel-nitrilotriacetic acid
毫升
镍-次氮基三乙酸
OD
Optical Density
光密度
PCR
Polymerase chain reaction
聚合酶链反应
PBS
Phosphate buffered solution
磷酸盐缓冲液
PAGE
Polyacrylamide gel electrophoresis
聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电
泳
1
RNA
rpm
ribonucleic acid
revolutions per minute
核糖核酸
转/分
rTaq
s
Thermos aquaticus (DNA polymerase)
second(s)
耐热 DNA 聚合酶
秒
S. pneumoniae
Streptococcus pneumoniae
肺炎链球菌
SDS
sodium dodecylsulfate
十二烷基硫酸钠
TBE
Tris boracic acid buffer
Tris 硼酸电泳缓冲液
TMB
3,3,5,5-Tetramethylbenzidine
3,3,5,5- 四甲基
联苯胺
TEMED
N,N,N’,N’-Tetramethylethylenediamine
N,N,N’,N’-四甲基乙
二胺
μl
microliter
微升
2
肺炎链球菌糖代谢蛋白 CcpA 对荚膜多糖的调控研究
摘要
目的
肺炎链球菌荚膜(Capsule CPS)是肺炎链球菌的一种重要的毒 力因子,在细菌定植、粘附中发挥重要作用,可保护细菌免受宿主的 吞噬杀伤作用。肺炎链球菌荚膜合成基因为一操纵子结构,即 cps 基因 座,其表达水平受其上游启动子的调控,但目前尚不清楚有哪些蛋白 可通过该启动子调控这些基因及 CPS 的合成。
我们前期研究通过 DNA pulldown 实验筛选到 CcpA 可能与肺炎链 球菌荚膜多糖(CPS)基因座启动子区域结合,且 CcpA(catabolite control protein A, CcpA)是
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