肺痨康对实验性结核小鼠免疫功能的实验研究-方剂学专业论文.docxVIP

成都中医药大学 成都中医药大学 2007 级硕士学位论文 5 5 英文缩略词表 缩略词 英文全称 中文全称 INH Isonicotinyl hydrazide 异烟肼 RFP Rifampicin 利福平 IgG Rat anti - mouse Immunoglobuline G 小鼠免疫球 IgG IFN-γ Rat anti – mouse γ Interferon 小鼠干扰素 γ RES Reticuloendothelial system 网状内皮系统 CMI Cell-mediated immunity 细胞介导免疫 CK GM-CSF CTL TB TCS ELISA Cytokine granulocyte macrophage-colony stimulating factor cytotoxic T lymphocyte Tuberculosis Trichosanthin Enzyme Linked immunosorbent assay 细胞因子 粒细胞-巨噬细胞 集落刺激因子 细胞毒性 T 细胞 结核 天花粉蛋白 酶联免疫吸附测 定 48 48 申 明 本人承诺：硕士学位论文肺痨康治疗耐药性肺结核的药效学研究 是本人在成都中医药大学攻读硕士学位期间在导师指导下独立进行 研究工作所取得的成果，无抄袭及编造行为。该论文著作权及涉及的 有关知识产权归成都中医药大学所有，有关该学位论文成果的开发、 转让、论文发表等，均需征得导师和成都中医药大学同意。 本人同意：成都中医药大学有权通过影印、复印等手段汇编学位 论文予以保存，并提供查阅和借阅；有权按照规定向国家有关部门、 机构送交论文及电子版，公布（或刊登）论文内容。 (注：论文涉及保密部分请事先做好处理) 硕士生签名： 导 师 签 名： 年 月 日 PAGE PAGE 10 引 言 肺结核（pulmonary tuberculosis）是由结核分枝杆菌引起肺部感染的传染 性疾病。结核病是全球主要传染性疾病之一，是一种严重危及人类生命健康，制 约社会经济发展的慢性传染病，由于其传染性强，传播迅速，影响范围广泛，历 来倍受重视。近年来随着人类免疫缺陷病毒感染与艾滋病急剧流行、人口增长与 移民、过去二十多年全球忽视结核病的控制、耐多药结核病例增多，肺结核病在 全球有所漫延，呈上升趋势。全世界有1/ 3 约20 亿人口感染结核杆菌 , 每年 新发病约800 多万, 死亡约200万[1 ] 。结核病疫情严重的原因之一，是耐多药结 核病广泛分布和迅速传播，抗结核病的保护性免疫机制目前仍不清楚,但细胞免 疫尤其是循环及感染部位的T细胞应答被认为起着重要作用[2]。研究已知，结核 病的发生、发展和转归与药物的疗效在一定程度上取决于患者的自身免疫功能 [3]。随着细胞和分子免疫学的发展，免疫细胞及其相关细胞因子（CK）在结核 病免疫中的作用引起高度重视。感染结核菌后机体同时产生Th1、Th2介导的免 疫反应，产生不同的免疫效果[4] 。国外学者采用CK，用于治疗结核病、耐多药 性结核病效果确切[5-7] ，但结核病的免疫是一柄“双刃剑”若调节不当将造成机 体组织损伤，外源性CK的干扰治疗尚不能达到监控和定向调节的目的[8]。而中医 药对机体免疫双向调节的作用具有更大的治疗优势。人们也逐渐意识到征服结核 病不能单纯依靠化学治疗,而应从免疫学等多角度探讨结核病。 肺痨康是导师经过多年临床摸索，在总结前人经验的基础上结合中医药理论 以及肺结核自身发病的特点自拟的经验方。本文研究是四川省科学技术厅攻关课 题“肺痨康治疗耐药性肺结核的药效学研究”的一部分，研究的目的是运用酶联 免疫吸附试验和肝肺病理学检查观察肺痨康对机体免疫功能的影响和增效减毒 的作用，为今后的实验以及新药开发奠定实验基础。 实验部分 1 免疫功能实验 1.1 实验材料 药品 肺痨康水煎液：配方由百部、紫河车、天门冬、白及、蛤蚧、猫爪草、三七 粉等组成，均购自同仁堂药店成都分店。药液制备：先按照临床用药煎煮方法熬 制成常规药液（阿胶除外），再用电热恒温水浴锅 40－60℃低温浓缩成最大浓度 （此时药液刚能吸入灌胃针），即:1g/ml，然后趁热加入阿胶烊化，临用时适当 加热，4℃冰箱保存备用。 阳性对照药物：异烟肼、利福平（纯度 98.3％，批号：030508。由中国疾 病预防控制中心结核病预防控制分中心提供。配制方法：RFP 先用二甲基甲酰胺 一滴溶解后，再用蒸馏水稀释。） 二甲基甲酰胺：成都化学试剂厂，批号：880305。 小鼠淋巴细胞分离液 LTS1092，批号：081102 PBS 磷酸盐缓冲液 （pH7.2-7.4）北京中杉金桥生物技术有限公司。 T 细胞亚群试剂盒(CD3 bs-0765R,