肥胖对气道炎症及重塑发生的影响及机制探讨-儿科学专业论文.docxVIP

重庆医科 重庆医科大学硕士研究生学位论文 万方数据 万方数据 英汉缩略语名词对照 英文缩写 AHR Leptin TGF-β1 英文全称 Airway hyper-responsiveness leptin transforming growth factor-β1 中文全称 气 道 高 反 应 瘦 素 转化生长因子-β1 BALF bronchoalveolar lavage fluid 支气管肺泡灌洗液 HFD High fat diet 高脂饮食 SD Standard diet 标准饮食 HFD-O Offspring from mother fed on HFD 高脂饮食后代 SD-O Offspring from mother fed on SD 标准饮食后代 PBS phosphate-buffered saline 磷酸盐缓冲液 ELISA Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay 酶联免疫法 HE hematoxylin-eosin 苏木精-伊红染色 α-SMA smooth muscle actin 平滑肌肌动蛋白 DNA deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸 RNA Ribonucleic Acid 核糖核酸 HRP Horseradish peroxidase 辣根过氧化物酶 ml milliliter 毫升 min minute 分钟 mg Milligram 毫克 Q-PCR RT-PCR Quantitative polymerase chain reaction Real time PCR 定量聚合酶链式反应 实时定量 PCR μl microliter 微升 rpm round per minute 转/min Mch Methacholine 乙酰甲胆碱 Penh Enhanced pause 增强呼气间歇 1 肥胖对气道炎症及重塑发生的影响及机制探讨摘要 第一部分 母代孕期及哺乳期高脂饮食对子代气道炎 症及气道重塑发生的影响及机制探讨 目的：以母代母孕期及哺乳期高脂饮食作为动物模型，观察母代高脂对子代 肺部炎症和气道重塑的影响。 方法：3-4 周雌性 SD 大鼠（购于重庆医科大学），分别给予高脂饮食、标准 饮食，至子代 3 周龄大。子代 SD 鼠以标准饮食喂养至 12 周龄。采用肺组织 HE 染色法观察母代高脂饮食对子代肺组织炎症的影响，α-SMA/TGF-β1 免疫组化和 Masson 染色检测母代高脂饮食对子代气道重塑的影响。 结果：母代母孕期及哺乳期高脂饮食明显增加子代出生体重及 12 周龄体 重、脂肪含量及血清瘦素水平；肺组织 HE 染色及炎症细胞定量分析发现母代母 孕期及哺乳期高脂饮食的子代支气管周围及肺泡周围存在明显的炎症细胞堆积； 肺组织 Masson 染色及 α-SMA/TGF-β1 免疫组化及平均光密度值定量分析结果显 示，母代母孕期及哺乳期高脂饮食可促进子代气道重塑。 结论：母代母孕期及哺乳期高脂饮食明显增加子代肺组织炎症细胞浸润及促 进气道重塑。 关键词：高脂饮食，肺组织炎症，纤维形成因子，气道重塑 2 第二部分 瘦素可减轻鸡卵清蛋白诱发的小鼠气道高反 应性 目的：通过观察瘦素对鸡卵清白蛋白诱发的气道炎症和气道反应性的影响， 探讨瘦素对鸡卵清白蛋白诱发的气道炎症及气道反应性病理生理机制。 方法：采用腹腔注射致敏及雾化吸入激发鸡卵白蛋白（OVA）的方法建立哮 喘模型，对照组采用腹腔注射及雾化吸入等量的生理盐水；于每次雾化激发前 30 分钟分别腹腔注射重组小鼠瘦素或等量的磷酸盐缓冲液。分为对照组、瘦素组、 哮喘组、哮喘瘦素组。最后一次激发后行肺功能测定检测肥胖对哮喘气道反应性 的影响，分析肺泡灌洗液中炎症细胞总数和分类计数、肺组织 HE 及 Masson 染色 检测瘦素对哮喘气道炎症和气道重塑的影响；实时定量 PCR、蛋白印迹等检测瘦 素对气道交感神经及副交感神经受体表达的影响。 结果：1) 短期瘦素对小鼠血清瘦素水平及小鼠体重没有明显影响 2）鸡卵清 白蛋白明显增加小鼠肺泡灌洗液炎症细胞计数。3）鸡卵清白蛋白明显增加气道 周围及肺泡间隔炎症细胞的聚集。4）瘦素可降低鸡卵清白蛋白诱发的气道高反 应性，可能通过降低肺组织平滑肌数量及增加肺组织 β2 受体降低胆碱能神经受 体的表达发挥作用。 结论：瘦素可减轻鸡卵清蛋白诱发的小鼠气道高反应性。 关键词：哮喘，肥胖，瘦素，炎症，气道反应性 3 THE EFFECT OF OBESITY ON AIRWAY INFLAMMATION AND REMODELING, AND ITS POTENTIAL MECHANISM ABSTRACT PART ? Maternal High-Fa