风湿性心脏病房颤患者microRNA表达水平的研究及hsa-miR-145-5p靶基因预测与功能探讨-免疫学专业论文.docxVIP

I I 目 录 缩略词表……………………………………………………………………………..Ⅱ 中文摘要……………………………………………………………………………..Ⅳ 英文摘要……………………………………………………………………………..Ⅵ 前言……………………………………………………………………………………1 第一部分 风湿性心脏病房颤患者 microRNA 表达水平的研究…………………. ..4 1 材料与方法………………………………………………………………………..4 1.1 材料……………………………………………………………………………..4 1.2 方法…………………………………………………………………………..…6 2 结果………………………………………………………………………………10 2.1 样本总 RNA 质检结果…………………………………………………………10 2.2 Affymetrix miRNA 芯片实验结果…………………………………………...11 3 讨论………………………………………………………………………………16 3.1 样本的采集和 RNA 质检………………………………………………………16 3.2 房颤相关 miRNA 检测筛查方法的选择及实验结果分析……………………17 第二部分 hsa-miR-145-5p 和 hsa-miR-1243 在心房组织表达差异的验证研究 20 1 材料与方法………………………………………………………………………20 1.1 材料……………………………………………………………………………20 1.2 实验方法………………………………………………………………………22 2 结果………………………………………………………………………………24 2.1 总 RNA 质检结果………………………………………………………………24 2.2 Real-time PCR 检测结果……………………………………………………26 3 讨论………………………………………………………………………………39 3.1 样本总 RNA 提取效果的评价及质量检验……………………………………39 3.2 对 Real-time PCR 检测结果的分析………………………………………...40 第三部分 hsa-miR-145-5p 调控房颤靶基因的预测与功能探讨………………...42 1 材料与方法………………………………………………………………………42 1.1 材料……………………………………………………………………………42 1.2 方法……………………………………………………………………………42 2 结果………………………………………………………………………………44 2.1 hsa-miR-145-5p 的结构……………………………………………………...44 2.2 has-miR-145-5p 靶基因的生物信息学预测结果…………………………...45 2.3 逐步筛选出的 has-miR-145-5p 调控房颤的靶基因………………………..46 2.4 has-miR-145-5p 调控房颤靶基因的功能及作用机制……………………...51 3 讨论………………………………………………………………………………52 3.1 RNA 的结构和作用机制……………………………………………………….52 3.2 靶基因预测方法及选择………………………………………………………53 3.3 靶基因的预测及筛选…………………………………………………………54 3.4 主要靶基因的功能和作用机制………………………………………………55 全文总结……………………………………………………………………………..60 参考文献……………………………………………………………………………..61 致谢…………………………………………………………………………………..67 综述…………………………………………………………………………………..68 II II 缩略词表 英文缩写 英文全称 中文名称 ADAM17 ADAM metallopeptidase domain 17 ADAM 金属肽酶域 17 ADAMTS5 ADAM metallopeptidase with thrombospondin type 1 motif,5 ADAM 金属肽酶含血小板 反应蛋白 1 基元,5 AF Atrial Fibrillation 心房颤动 ASA American Society of Anesthesi-ologists CACNA1D Calcium c