三倍体雌性虹鳟性腺发育阶段细胞色素相关基因的表达-中国水产科学.PDFVIP

中国水产科学 2018 年9 月, 25(5): 949957 Journal of Fishery Sciences of China 研究论文 DOI: 10.3724/SP.J.1118.2018.17329 三倍体雌性虹鳟性腺发育阶段细胞色素相关基因的表达 1, 2, 3 2 2 2 2 2 相福生 , 徐革锋 , 谷伟 , 黄天晴 , 刘晨斌, 王炳谦 1. 上海海洋大学 水产科学国家级实验教学示范中心, 上海 201306; 2. 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所, 黑龙江 哈尔滨 150070; 3. 上海海洋大学 水产动物遗传育种中心上海市协同创新中心, 上海 201306 摘要: Cyp19a1b、Cyp11a1、Cyp11b2、Cyp17a1、Hsd3b1 等细胞色素相关基因能够调节硬骨鱼类性类固醇的合成, 对 性腺发育和性别决定产生影响。本研究以全雌三倍体虹鳟(Oncorhynchus mykiss)为研究对象, 正常雌性二倍体虹鳟 为对照, 选取31~68 dpf (days post fertilization)时间段的虹鳟仔鱼脑组织, 采用qRT-PCR 和酶联免疫的方法研究以 上几种基因的表达状况和脑芳香化酶的活性变化, 以期探明导致三倍体雌性虹鳟性腺发育异常的关键原因。qRT- PCR 结果显示, 二倍体中Cyp19a1b 在30~50 dpf 时表达量上调并且维持在较稳定水平, 但50~56 dpf 时表达量逐渐 下调, 之后 56~68 dpf 表达量持续上调; 三倍体中 Cyp19a1b 表达量在 30~35 dpf 开始上调, 35~47 dpf 逐渐下调, 47~55 dpf 开始第二次上调, 之后维持在较稳定水平直至68 dpf, 但三倍体 Cyp19a1b 的表达量显著(P0.05)低于同 期二倍体的。二倍体 Cyp11a1 表达量在34 dpf 出现峰值, 三倍体 Cyp11a1 在38 dpf 时出现峰值。二倍体Hsd3b1 表达量在33~42 dpf 时维持在较高水平, 在38 dpf 时出现高峰; 三倍体Hsd3b1 表达量在47~59 dpf 时较高, 在49 dpf 出现高峰。二倍体中 Cyp11b2 在37 dpf 出现峰值, 之后开始下调; 三倍体在40 dpf 出现峰值, 之后逐渐下调, 但 三倍体 Cyp11b2 表达量显著低于同期二倍体。二倍体 Cyp17a1 的表达量在35~46 dpf 时逐渐上升, 在45 dpf 时达 到高峰之后直至 69 dpf 逐渐下降, 并且维持在较为平稳的水平上; 但是在相同的实验条件下未检测到同一时期三 倍体Cyp17a1 的表达量。酶联免疫结果显示, 在40 dpf 时二者的脑芳香化酶活性到达高峰, 但在40~60 dpf 时期, 二 倍体虹鳟脑芳香化酶活性显著(P0.05)高于三倍体虹鳟, 尤其在45~50 dpf 时, 该酶活性分别较三倍体的高 1.15 倍 和1.12 倍。以上结果表明三倍体虹鳟早期性腺发育迟缓的原因之一是Cyp19a1b、Cyp11a1、Cyp11b2、Cyp17a1、Hsd3b1 等基因的表达晚于二倍体, 且表达量低于二倍体, 造成雌二醇不能正常合成, 最终导致性腺发育迟缓。 关键词: 虹鳟; 性腺发育; 脑芳香化酶; 细胞色素 中图分类号: S917 文献标志码: A 文章编号: 10058737(2018)05094909 虹鳟(Oncorhynchus mykiss) 自20 世纪50 年代 而影响性腺发育的神经类固醇物质的合成起始于 引进中国以来, 因其较高的经济价值和食用价值 脑部。而相关的神经类固醇生成酶由细胞色素 受到养殖者的青睐。相比于二倍体虹鳟, 三倍体 P450 家族的部分基因编码[2], 这些基因在虹