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Ｃ反应蛋白新应用 　　C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)是目前最有价值的急性时相反应蛋白,属分泌型蛋白质[1]#65377;它最早发现于1930年,当时美国洛克菲勒研究院的Tillett和Francis发现急性感染病人的血清能和肺炎链球菌的C组分(C多糖,C-polysaccharide)发生沉淀反应[2]#65377;到1941年,Avery等用硫酸铵沉淀和C多糖沉淀的方法粗提,得到一种蛋白质,于是正式命名为C-反应蛋白[3]#65377;它的升高可以提示许多炎症事件的发生,长久以来被广泛应用于感染性疾病的诊断及监测,且升高程度常与炎症#65380;组织损伤的程度呈正相关,所以现已被临床广泛应用#65377;近年来大量的文献报道CRP的临床价值引人注目,本文就其生物学特性#65380;测定方法以及在临床中的最新应用进展等作一综述#65377; 　　 　　1CRP的生物学特性 　　 　　1.1CRP的结构CRP是一种主要由肝脏合成的蛋白质,用电子显微镜技术和X射线衍射技术阐明了CRP的分子结构#65377;其分子结构是由5个完全相同的球形单体相互以非共价键形式构成的平面对称五边形的环状五球体[2]#65377;CRP的分子量约105 500道尔顿,沉降系数为7.58,等电点为5.7~6.0#65377;每个分子含有5个相同的未糖基化的多肽亚单位,每个亚单位由1条206个氨基酸残基,分子量23 017道尔顿的多肽链组成[4] #65377;白细胞介素6(IL 6)#65380;肿瘤坏死因子a(TNF a)#65380;白细胞介素1(IL 1)对CRP的生成有调节作用#65377;CRP的生物学功能[1,4,5]①在钙离子存在下,能结合细菌#65380;真菌等各种内源性和外源性的多糖物质,形成复合物后成为以C1q开始的经典补体途径的强效激活物,激活补体系统;②CRP具有重要的调理素作用,能增加巨噬细胞的活性和运动,促进对各种细菌和异物的吞噬;③它能与T淋巴细胞特异性地结合,抑制T抑制细胞和增强T辅助细胞的功能;④抑制血小板的磷脂酶,减少其炎症介质的释放#65377; CRP在感染#65380;炎症#65380;组织损伤#65380;恶性肿瘤等刺激下,2h后即可升高,48h达峰值,超过正常水平的10倍#65380;百倍甚至千倍,远早于体温#65380;白细胞计数等改变#65377;其半衰期短于24h,一旦感染被控制其浓度可迅速回落,恢复至正常#65377;而且影响发热#65380;血沉和白细胞增加的各种因素对CRP多无影响#65377;同时,CRP亦不受常用抗炎药物或免疫抑制药物的直接影响#65377; 　　 　　2CRP的测定方法 　　 　　临床实验室CRP检测方法大致可以分为免疫沉淀法#65380;免疫浊度法和标记免疫测定法三类#65377;免疫沉淀法最早出现,但其方法较粗糙,结果判断时间长且准确度差, 早已停止使用#65377;胶乳凝集试验是半定量的,由于其不良的精确度和准确度,这种方法已经基本停止使用[2]#65377; 　　目前常用的CRP检测方法有免疫浊度法(如散射#65380;透射比浊法,并且已实现了自动化)和标记免疫测定法#65377;其中,透射免疫和散射免疫方法,这些方法的参考值范围变动很大,从3mg/L到超过200mg/L[6]#65377;随着人们对于低水平CRP与心血管疾病关系的认识,这些测定方法的灵敏度远远不能满足要求#65377;为了达到所需定量的检测精度,研究人员已经对现有的实验方法进行了改良和更新#65377;Sanchez等[7]对一种改良的免疫浊度法进行了评价,其最低检出限为0.26mg/L,日间变异系数在0.66mg/L时为10%,在CRP浓度较高时也不受胆红素#65380;血红蛋白#65380;甘油三酯以及类风湿因子的影响#65377;与传统的比浊法相比,其方法简单#65380;快速,样本体积需要量小,提高了检测的灵敏度和准确度#65377;Hafner等[8]也报道了一种在Olympus AU640分析仪上测定CRP含量更灵敏准确的免疫浊度法,其线性范围为5~200mg/L,批内变异系数[9]对微量床旁CRP检测法进行了评价,该方法的最低检出限为0.1mg/L,线性范围在系统误差为10%和20%时分别为2~60mg/L及0.3~60mg/L;总变异在0.7~9.1mg/L时为500mg/L时才会出现,但该方法在CRP2mg/L时准确性较高,且可用末梢血,患者易接受,可随身携带,操作简便,5min即可测得结果#65377;此类采用超敏感方法检测到的CRP,被称为“超敏CRP(high sensitive C-reactive protein,hs