环境暴露下错配修复基因hMLH1和hMSH2多态性与肝细胞癌的关联研究-外科学专业论文.docxVIP

目 目 录 fIIIlll rl Ill UFrllil l Jlllilil IIi Y2606997 中文摘要 一1 ABSTRACT 4 英汉缩略词对照表 7 前日IJ 言舌 88 1材料与方法 12 1．1 研究对象 ．．12 1．2 调查方法 12 1．3 调查内容 ．．12 1．4血样采集 ．．1 3 1．5主要实验仪器和主要实验试剂 ．．13 1．6主要试剂配制 ．．14 1．7基因组DNA提取及保存 ．15 1．8基因SNP检测 16 1．9统计方法 ．．19 2 结果 20 2．1 一般情况 一20 2．2环境危险因素与HCC的关联研究 22 2．3基因分型结果 一22 2．4 HARDY-WEINBERG平衡吻合度检验 24 2．5基因多态性与HCC易感性的关系分析 25 2．6基因一环境交互作用与HCC易感性的关系分析 ．．28 2．7基因一基因交互作用与HCC易感性的关系分析 ．．29 3 3 讨论 29 3．1环境危险因素与HCC的关联研究 31 3．2基因多态性与HCC易感性的关系 33 3．3基因．环境交互作用与HCC易感性的关系 ．．35 3．4基因．基因的交互作用与HCC易感性的关系 ．．37 4 结论 ．．38 5存在的问题及展望 39 参考文献 39 综述 ．47 攻读学位期间发表的学术论文目录 60 致谢 64 IV 环境暴露下错配修复基因hMLHl和hMSH2多 环境暴露下错配修复基因hMLHl和hMSH2多 态性与肝细胞癌的关联研究 中文摘要 目的：了解广西地区人群环境暴露下环境危险因素与肝细胞癌的关系，探 讨人群中错配修复基因hMLHl和hMSH2单核苷酸多态性(SNP)的分布 特点，研究hMLHl和hMSH2基因多态性与肝细胞癌(HCC)患病风险的 关系，分析hMLHl基因和hMSH2基因多态性之间以及hMLHl基因和 hMSH2基因多态性与肝癌家族史、吸烟、饮酒等肝癌危险因素在HCC发 病中的交互作用，为从新的角度诠释肝细胞癌发病机理及其综合防治措施 提供新的思路和理论依据。 方法：以医院为基础的病例对照研究。选择桂林医学院附属医院、广西壮 族自治区南溪山医院、广西医科大学肿瘤医院就诊和治疗的肝细胞癌病例 453例和同期在上述医院的健康体检者。对病例组和对照组进行面对面调 查，调查员均经过专门培训，调查内容包括既往史、人口学资料、个人史、 吸烟史、家族史、饮酒史以及饮食习惯和生活方式等。研究对象入院次日 清晨空腹采集静脉血2ml，于当日提取其基因组DNA。之后采用高通量的 TaqManMGB实时荧光定量聚合酶链式反应(Real．time quantitative polymerase chainreaction，PCR)实验方法，对hMLH 1和hMSH2进行基因 分型。应用SPSS 1 9．0 for windows统计软件对数据进行统计分析。计量资料 采用t检验和方差分析，计数资料的比较采用X2检验或者确切概率法。因 素间的交互作用以多因素logistic回归模型进行分析，以比值LL(odds 素间的交互作用以多因素logistic回归模型进行分析，以比值LL(odds ratio， OR)及其95％可信区间(confidence interval，CI)表示相对危险度。 结果：研究对象的一般资料显示：调查共收集到符合要求、资料完整的HCC 新发病例453例和相应对照475例。其中，病例组最小年龄21岁，最大年龄 75岁，平均年龄47．6±1 0．3岁：对照组最小年龄22岁，最大年龄72岁，平均年 龄46．8±11．8岁。经均衡性检验，病例组与对照组在年龄、性别等方面差异 均无统计学意义(PO．05)。(1)病例组hMLHl基因(rsl800734)位点AA、 AG和GG各基因型频率在病例组和对照组中相比，差异有统计学意义 (P=0．001)。与AA基因型相比，AG和GG基因型的个体罹患HCC的风险OR 分别为1．033(95％CI=0．778．1．371)和1．842(95％CI=1．242．2．733)。病例组的 AG／GG基因型频率较对照组明显降低(X2=4．194，P=0．041)，其OR为1．323 (95％CI=1．012。1．729)。(2)病例组hMSH2基因(rs2303428)位点CC、CT 和TT各基因型频率和对照组中相比，差异有统计学意义(P=O．016)。与CC基 因型相比，CT和TT基因型的个体罹患HCC的风险OR分别为1．811 (95％CI=I．167．2．809)和1．874(95％CI=I．199．2．929)。病例组的CT／TT基因型 频率较对照组明显降低(X2=8．229，P=0．004)，其OR为1．839 (95