高山被孢霉花生四烯酸生物合成的代谢调控-生物化工专业论文.docxVIP

华中科技大学硕士学位论文摘要 华中科技大学硕士学位论文 摘要 花生四烯酸(AA)是人体的必需脂肪酸，具有多种重要的生理功能，因而具有广泛 的应用前景，利用微生物发酵产AA是近年来国内外的研究热点。本论文首先对被孢 霉AA生物合成的条件进行了优化，在此基础上，从底物和前体、还原力和容量传递系 数(Kka)等方面对被孢霉合成AA进行代谢调控糌果如下： 1，含8％葡萄糖的淀粉糖化液、含4 g，L蛋白质的豆饼粉浸汁及3 g／L KH2P04 f．‘ 和2 g／LNa2HP04是被孢霉AA生物合成的最佳碳、氮、磷源。 !： 2．o．3％毛霉菌油作为前体时被孢霉中AA产量达1．639／L，比对照提高了43％， v 认为毛霉菌油含有大量亚麻酸，从而可以加速亚麻酸向AA的转化。 3．分析了还原型烟酰胺嘌吟二核苷酸磷酸(NADPH)产生酶一葡萄糖．6一磷酸 脱氢酶(G6PDH)和苹果酸酶(ME)与被孢霉AA生物合成的关系，结果表明G6PDH 和ME的活性与被孢霉生长及AA的生物合成成正比例关系。O．89／L谷氨酸促进被孢 1}}i}0l，l， 霉AA的生物合成，其产量1．41 g／L，为对照的168％，认为谷氨酸提高被孢霉AA的 生物合成是因为激活了G6PDH和ME，从为被孢霉AA的合成提供更多的NADPH。 4．在摇瓶水平比较均一培养条件下进行放大培养的过程中，局．a显著降低，被孢 霉生长、花生四烯酸(AA)产量也降低，表明KLa与被孢霉AA生物合成密切相关。 5．通过筛选对被孢霉AA生物合成最佳的氧载体，发现O．3％Tween 20最有利 于被孢霉AA的生物合成，加入O．3％Tween 20 AA产量达1．61 2／L，比对照提高了 31％。O．3％Tween 20除了可以提高被孢霉发酵体系的鼠a、还可以提高NADPH产生 酶一G6PDH和ME活性，因此认为Tween20提高AA产量是由以下两方面的结果：一 方面是由于其提高培养体系中的鼠a，从而增加培养基中的溶解氧浓度，另一方面， 提 ◆}}_弋} 多物铽 华中科技大学硕士学位论文Abstract 华中科技大学硕士学位论文 Abstract Arachidonic acid(AA)，the essential fatty acid in human body,has been come to front due tO its multifarious important physiological activities；AA production from microbial fermentation is the hotspot in recent years．In present study,the culture conditions suitable for AA biosynthesis in Mortierella dpina were firstly established，and then AA biosynthesis was regulated by precursor,renox power and volume transfer coefficient (KLa)，and got the following results： 1 Starch saccharifying liquid containing 8％glucose．soy flour liquor containing 4 ∥L protein and 3 g／L KH2P04，2 g／L Na2HP04 were the most suitable carbon，nitrogen and phosphate source for AA biosynthesis from Mortierella dpina． ’ 2．Addition of 0．3％oils from Mucor as precursor made AA yield in Mortierella alpina reached 1．639／L，which was increased 43％compared with the control，indicating that oils from Mucor containing high 7-linolenic acid(GLA)content contributed to AA biosynthesis． 3．The relationship between reduced nicotinamide adenine dinucleotide(NADPH) producing enzymes--glucose一6一phosphate dehyderogenase(G6PDH)and m