高迁移率族蛋白B1在香烟暴露大鼠模型中的表达及其意义-内科学(呼吸系病)专业论文.docxVIP

2 2 英文缩略词表 Abbreviations 英文缩写 英文全称 中文全称 HMGB1 high mobility group box-1 protein 高迁移率族蛋白 B1 COPD chronic obstructive pulmonary disease 慢性阻塞性肺疾病 BALF bronchoalveolar lavage fluid 支气管肺泡灌洗液 ELISA enzyme-linked immunosorbent assay 酶联免疫吸附实验 IOD integral optical density 平均积分光密度值 IL interleukin 白细胞介素 IFN interferon 干扰素 TNF tumor necrosis factor 肿瘤坏死因子 LPS lipopolysaccharide 脂多糖 LTB Leukotriene 白三烯 RAGE receptor for advanced 晚期糖基化终产物受体 glycation endproduct MAPK mitogen-activated protein kinase 促分裂原活化蛋白激酶 NF-ΚB nuclear factor-ΚB 核因子-ΚB MIP macrophage inflammatory protein 巨噬细胞炎症蛋白 HE Hematoxylin eosin stain 苏木素伊红染色 IHC immunohistochemistry 免疫组织化学技术 ICC immunocytochenmistry 免疫细胞化学技术 SP streptavidin-perosidase 链霉菌抗生物素蛋白 氧化物酶连接法 CLP cecum liquation and puncture 盲肠结扎穿孔术 DAB 3,3-diaminobenzidine 二氨基联苯胺 TMB 3，3,5,5-Tetramethyibenzidine 四甲基联苯胺 OD optical dentsity 光密度值 PAGE PAGE 3 高迁移率族蛋白 B1 在香烟暴露大鼠模型中的表达 及其意义 摘 要 研究背景：慢性支气管炎（chronic bronchitis）是一种全球性患病率和死亡率很 高而病因及发病机制尚不完全清楚的疾病，严重危害着中老年患者的健康，目前认 为是一种可防可治的疾病。危险因素包括吸烟、粉尘、刺激性气体、感染、免疫、 年龄、气候等，其中吸烟是引起慢性支气管炎发生、发展的最主要等危险因素。烟 熏法复制慢性支气管炎动物模型的研究已有成功应用。高迁移率族蛋白 B1（high mobility group box-1 protein,HMGB1）是一种普遍存在的高度保守的核蛋白，参 与 DNA 的转录、复制、修复以及炎症反应等。正常情况下,人类和大鼠气道内即有 一定水平 HMGB1 表达,对呼吸系统正常功能的维持具有重要作用。在肺组织中, HMGB1 具有促炎细胞因子的作用,是介导急性肺部炎症反应重要的生物学介质。HMGB1 可作 为一种晚期重要的炎症因子参与对炎症的调控作用，在肺损伤、肺癌、肺纤维化、 COPD 等肺部疾病中已有大量研究，但 HMGB1 在大鼠慢性支气管炎模型中的作用尚无 报道。因此本研究用烟熏法模拟人类慢性支气管炎的发病过程拟检测 HMGB1 在大鼠 模型中的表达，初步探讨 HMGB1 在慢性支气管炎中的作用。 目的：通过烟熏法建立大鼠慢性支气管炎模型，检测大鼠模型肺组织及血清中 HMGB1 的表达情况，比较 HMGB1 在模型组与对照组两组之间的差别，初步探讨 HMGB1 在香烟诱导的慢性支气管炎大鼠模型中的作用。 方法：将雄性 SD 大鼠随机分为正常对照组、吸烟模型组，每组 14 只。模型组大 鼠置于自制密闭烟熏箱内进行被动吸烟，每天烟熏 2 次,每次 14 支,烟熏 30min , 烟雾浓度约 5％（v ／ v），两次之间相隔不少于 4 h , 每周被动吸烟 6d ,连续 75 d, 对照组正常饲养，不作上述处理，建立慢性支气管炎大鼠模型。模型成功 后，光镜下观察支气管肺组织病理形态学改变，分析支气管肺泡灌洗液（BALF） 细胞计数和分类，用 ELISA 法检测大鼠血清中 HMGB1 的浓度，免疫组化法检测 HMGB1 在肺组织中的表达。 结果：模型组大鼠肺组织的病理形态改变与人类慢性支气管的特点相一致。模型 组和健康对照组大鼠 BALF 的细胞总数、单核巨噬细胞及中性粒细胞百分比分别为 （5.12±0.69×108/L、69.62±4.82%、22.62±2.47%；1.79±0.19×108