egf和htert基多态性与乳腺癌易感性的关联研究-流行病与卫生统计学专业毕业论文.docxVIP

南京医科大学硕士学位论文EGF和hTERT基因多态性与乳腺癌易感性的关联研究 南京医科大学硕士学位论文 EGF和hTERT基因多态性与乳腺癌易感性的关联研究 南京医科大学公共卫生学院 流行病与卫生统计学系 研究生王艳 指导老师沈洪兵 摘要 乳腺癌是全世界女性最常见的恶性肿瘤，已成为威胁女性健康的 最重要疾病之一．世界范围内乳腺癌发病呈不断上升的趋势，我国虽 属女性乳腺癌的低发病区，但近年来乳腺癌的发病率逐年快速增长， 尤其在沪、京等地区，乳腺癌的发病率已高居女性恶性肿瘤发病率的 第一、第二位。乳腺癌严重威胁着女性的健康和生命，对社会、经济、 家庭和妇女心理造成极大的影响。如何识别乳腺癌的高危人群，降低 乳腺癌的发病率，是摆在我们面前的重要问题。但乳腺癌病因尚不明 确，发病机制也十分复杂，目前认为乳腺癌的发生、发展是环境与遗 传因素共同作用的结果。不同遗传背景的个体在相同的危险因素暴露 下发生乳腺癌的危险性不同，说明遗传背景的差异影响了个体癌症易 感性的高低。因此，识另,ISL腺癌易感基因是鉴别乳腺癌高危人群的关 键。众所周知，乳腺癌的高共显性基因BRCAl、BRCA2突变是乳腺 癌的强危险因素，但BRCAl、BRCA2突变在一般人群中对乳腺癌发 病的贡献彳艮小，仅占5％以下，故认为大部分的乳腺癌易感性与常见 的低共显性基因的遗传变异有关。寻找与乳腺癌遗传易感性相关的常 见低共显性基因是目前研究的一个热点。 南京医科大学硕士学位论文研究表明，在乳腺癌的病理进程中，雌激素起了重要的作用。表 南京医科大学硕士学位论文 研究表明，在乳腺癌的病理进程中，雌激素起了重要的作用。表 皮生长因子(EGF)作为强有力的有丝分裂剂，具有类雌激素作用， 同样在乳腺癌的发生发展过程中扮演了重要的角色。EGF在组织中的 过表达可持续性激活多条信号传导通路，促进DNA合成，加速细胞 的分裂和增殖，抑制细胞的凋亡，从而促进乳腺癌的发生、发展。已 有研究发现，EGF基因启动子区的单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphisms，SNPs)不仅与外周血EGF水平有关，而且与癌症的 发病风险相关。同时，由于EGF可以通过启动Ras．MAPK信号通路， 激活端粒酶逆转录酶(hTERT)，上调hTERT mRNA的表达，而该酶 的激活可促使端粒不再随细胞分裂而缩短，细胞得以无限制的增殖下 去，最终导致肿瘤的发生。并且，hTERT在正常人类体细胞中不表 达，但是在包括乳腺癌在内的多种肿瘤中表达。故推测EGF、hTERT 的SNPs及血浆EGF水平可能与乳腺癌遗传易感性有关。 本研究旨在通过血清流行病学和分子流行病学相结合的手段，采 用病例对照研究方法，对血浆EGF水平以及EGF基因启动子区SNPs 和hTERT的功能性SNPs与乳腺癌遗传易感性的关系进行研究，进一 步阐明乳腺癌的发病机制和发现与我国人群乳腺癌遗传易感性相关 的危险基因型，并将其作为分子标志物用于筛选高危人群，从而为今 后乳腺癌的早期诊断和早期治疗提供科学依据。 第一部分 表皮生长因子基因(E觎)启动子区多态性、血浆EGF水平与 乳腺癌易感性的病例对照研究 研究发现，EGF启动予对EGF的表达起关键的调控作用，提示 该区域的遗传变异可能影响不同个体EGF的表达水平，进而影响疾 病的易感性。已有研究表明，EGF启动子区G61A位点的突变可降 南京医科大学硕士学位论文低外周血EGF的水平，且降低患恶性黑色素瘤的风险。因此，EGF 南京医科大学硕士学位论文 低外周血EGF的水平，且降低患恶性黑色素瘤的风险。因此，EGF 基因启动子区域的多态性改变可能潜在地影响其表达(血浆水平)从 而改变个体对肿瘤的易感性。 本研究探讨了EGF基因启动子区稀有等位基因频率(MAF， minor allele frequency)高于O．05的多态性改变(G61A、G．1380A和 A-1744G)及血浆中EGF水平与乳腺癌发病的关联。采用病例对照研 究设计，选择经组织学确诊的629例新发乳腺癌病例和694例年龄和 地区匹配的无肿瘤史的健康对照。采用PCR-RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism，限制性片断长度多态性)、PCR-PIRA (Primer Introduced Restriction Analysis，引物引入限制性分析)法设 计引物和内切酶进行基因分型。采用ELISA(Enzyme．Linked Immunosorbnent Assay，酶联免疫吸附试验)法进行血浆EGF水平的 检测。此外，基因型检测采用盲法，并随机抽取10％样本重复检测 进行实验室质量控制。最后，我们成功获得604例(96．O％)乳腺癌 病例和654例