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第四节 转基因技术动物 Transgenic Animal 一、概述 二、哺乳动物转基因技术的研究意义 三、哺乳动物转基因技术的主要环节 四、哺乳动物转基因技术存在的主要问题 一、概述 1976年Jaenisch等获得含有SV40 DNA的嵌合体小鼠。 1980年，Gordon应用显微注射法首次成功地将重组的外源DNA直接注入小鼠受精卵雄原核中，获得了携带外源基因小鼠。 1982，Palmiter将大鼠的生长激素基因用微注射方法导入小鼠的受精卵中获得巨型小鼠（supermouse），从而在理论上和实践意义上都将转基因技术提高一步，引起生物学界极大的关注，为基因工程育种提供诱人的前景。 早期以提高生长为主 以生产药用蛋白和可移植的器官 转基因技术：通过一定方法把人工重组的外源DNA导入受体动物的基因组中或把受体基因组中的一段DNA切除，从而使受体动物的遗传信息发生人为改变，并且这种改变能稳定地遗传给后代的技术。 通过转基因技术诱导基因组改变的动物称转基因动物(transgenic animal）。 二、哺乳动物转基因技术的研究意义 1、在基础生物学中 2、在基础医学研究中 3、在畜牧业中 三、制备转基因动物的基本程序 1、目的基因克隆和体外重组 1）人工合成 2）互补DNA（cDNA）的克隆 3）DNA克隆 2、外源基因的导入 将目的基因转入→培养→产下后代 3、外源DNA整合、转录及表达的分子检测 是否是转基因动物 2、外源基因的导入方法 1）显微注射法-微注射法 （microinjection） 它是创造转基因动物的有效途径。 2）逆转录病毒介导法 4）精子载体法 意大利Lavitrano等1989年首次报道利用精子作为载体获得了转基因小鼠。 5）细胞核移植法 6）生殖细胞转染法 3、外源DNA整合、转录及表达的分子检测 1）外源基因的整合检测 2）外源基因的转录检测 3）外源基因的表达检测 * * 表达荧光的转基因鱼 3）胚胎干细胞法生产转基因动物的流程图 * * *