内切葡聚糖酶基因在巨大芽孢杆菌中重组表达载体的构建-四川资料.docVIP

PAGE PAGE 15 内切葡聚糖酶基因在巨大芽孢杆菌中重组表达载体的构建 生物科学 2003 级 廖俊华 指导教师 陈 惠 教 授 摘要：以生物化学与分子生物学实验室克隆并测序的枯草芽孢杆菌C-36内切葡聚糖酶基因（Genbank 登录号：DQ782954）为模板，通过PCR将编码信号肽的序列去除，然后与pMD18-T Vector克隆载体连接，构建pMD18-T Vector亚克隆载体。对pMD18-T Vector质粒先进行BglⅡ单酶切，回收后再进行SphⅠ单酶切，通过两次单酶切胶回收内切葡聚糖酶基因（不含信号肽），并构建巨大芽孢杆菌重组表达载体pHEC-End，将重组表达载体转化到大肠杆菌DH5α中。通过对转化子进行菌落PCR和质粒的酶切检测证明成功构建了内切葡聚糖酶的巨大芽孢杆菌表达载体。 关键词：巨大芽孢杆菌，枯草芽孢杆菌， 内切葡聚糖酶 ，重组表达载体 Construction of eukaryotic Expression Vector of the gene of endoglucanase in Bacillus Megaterium LIAO Jun-hua Biological Science, Grade 2003 Directed by Chen Hui( Prof) Abstract: By