2018年人教版高中生物 选修一 微生物的实验室培养 名师公开课省级获奖课件（41张）.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * （2）在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 答：以免接种环温度太高，杀死菌种。 （3）在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 3个划线平板 1个不划线平板 （重复实验） （空白对照） （3）培养 放入37℃恒温箱中培养12h～24h 2.稀释涂布平板法 ①菌液的梯度稀释： ②涂布平板操作： (1)概念与原理： 聚集的微生物 单个细胞 菌液梯度稀释 菌落 涂布平板 (2)操作： 生长繁殖 ①系列梯度稀释操作 9mL无菌水 9mL无菌水 9mL无菌水 9mL无菌水 9mL无菌水 9mL无菌水 注意：移液管需要经过灭菌；试管口和移液管离火焰1～2cm处。 ②涂布平板操作： (1)涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？ 答：应从操作的各个细节保证“无菌”。 例如:①酒精灯与培养皿的距离要合适 ②吸管头不要接触任何其他物体 ③吸管要在酒精灯火焰周围等等 各梯度分别涂布3个平板 1个不涂布作空白对照 稀释103倍 稀释104倍 稀释105倍 放入37℃恒温箱中培养12h～24h （3）培养 1.临时保藏： 试管固体斜面培养基上 4℃ 2.长期保存： 菌种易被污染、变异 甘油管藏 1ml甘油＋1ml菌液 －20℃ 三 菌种的保存 3～6个月，转移培养 四 成果评价 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。 （二）接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求。 （一）培养基的制作是否合格 （三）是否进行了及时细致的观察与记录 培养12h与24h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察到其他一些细微的变化。 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养 课题背景 微生物研究和应用的前提： 如何获得纯净培养物？ 防止杂菌入侵，获得纯净的培养物 ①合适的营养和环境条件 ②确保其他微生物无法混入 一 基础知识 1.概念： 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 2.类型： 按物理性质划分： 按化学成分划分： 按用途划分： （一）培养基 固体培养基 液体培养基 有 无 凝固剂琼脂 分离 鉴定 工业 生产 （1）按物理性质划分： 单个 或少数菌体 2.特征： 大小、形状、光泽度、颜色、透明度等。 3.意义： 1.定义： 鉴定菌种的重要依据 固体培养基上 大量繁殖 子细胞群体 ※菌落 天然培养基 合成培养基 化学成分不恒定的天然有机物 如：牛肉膏蛋白胨培养基、马铃薯培养基 化学成分完全了解的物质配制而成的培养基 如：高氏1号培养基、查氏培养基。用于分类和鉴定 （2）按化学成分划分： 基础培养基 鉴别培养基 含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质 将某种类微生物从混杂的微生物群体中分离出来 用于鉴别不同类型微生物的培养基 选择培养基 （3）按用途划分： ※几种选择培养基 ①加入青霉素的培养基 分离酵母菌、霉菌等真菌 ②不加氮源的无氮培养基 分离固氮菌 ③不加含碳有机物的无碳培养基 分离自养型微生物 3.基本成分： 碳源、氮源、水、无机盐 ⑴碳源 无机碳源： 有机碳源： CO2、CO32-、HCO3- 牛肉膏、蛋白胨等 自养微生物 异养微生物 ⑵氮源 无机氮源： 有机氮源： NH4＋、NO3- 牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等 注：含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源 4. 配制原则 (1)目的明确： (2)营养全面、浓度适宜、比例恰当 (3)适宜的pH值： 有机碳源 异养型： 根据微生物的种类、培养目的选择原料 自养型： 不加碳源 加入缓冲剂 细菌偏碱，真菌偏酸 （CO2碳源） 生产 科研 微生物生长不可缺少的微量有机物 如：维生素、氨基酸、碱基等 (4)特殊营养： ※蛋白胨: