真核生物基因表达调控邱.ppt

真核基因表达调控的最显著特征是能在特定时间和特定的细胞中激活特定的基因，从而实现“预定”的、有序的、不可逆转的分化、发育过程，并使生物的组织和器官在一定的环境条件范围内保持正常功能。 原核生物的调控系统就是要在一个特定的环境中为细胞创造高速生长的条件，或使细胞在受到损伤时，尽快得到修复，所以，原核生物基因表达的开关经常是通过控制转录的起始来调节的。 真核生物的基因表达调控 一、染色体与DNA水平的调控 二、转录水平的调控 三、转录后水平的调控 四、翻译水平的调控 五、翻译后水平的调控 六、发育调控 一、染色体与DNA水平的调控 （一）、真核生物色质结构 　（二）染色质的重塑 原核生物的基因组是裸露的，其RNA聚合酶可直接识别启动子，起始转录。而真核生物的基因组和组蛋白结合压缩形成复杂的染色质结构。对真核生物的RNA聚合酶来说，和启动子的结合受染色质结构的限制。只有解除对转录模板的限制才能启动基因的表达。染色质中相关区域的结构改变，使转录活化的过程被称为染色质的重塑（chromatin remodeling）。染色质重塑导致核小体的结构发生变化，转录因子和RNA聚合酶得以接近并结合启动子，使转录发生。 用核酸酶处理染色质，再进行凝胶电泳显示，具有转录活性的基因和不具有转录活性的基因都出现200bp的条带，说明两者都具有核小体结构，因此认为转录的过程中需要核小体的移位，即RNA聚合酶结合部位的核小体需要暂时移开，等待RNA聚合酶作用后再重新组装。实验发现，纯化的DNA加入核心组蛋白温浴后重建的染色体转录能力下降了75%，当在加入组蛋白H1后，转录能力可进一步下降25-100倍。如果在加入H1前先加入Sp1和Gal4等活化蛋白，组蛋白抑制转录的效应可被活化因子阻止。关于转录活化因子调节基因表达中最为普遍接受的为：重塑蛋白首先与核小体结合，不改变其结构，但使其松动并移位，顺式作用原件暴露出来，和相关转录因子或RNA聚合酶结合，启动转录过程。 （三）、组蛋白的共价修饰 组蛋白N末端氨基酸残基可发生乙酰化、甲基化、磷酸化、泛素化等多种共价修饰作用，这些修饰对染色质的活性有着重要的调控作用。 组蛋白的乙酰化和去乙酰化 (四) 基因的丢失与扩增 1.基因丢失（体细胞中染色体裂解成小染色体） 马蛔虫（Parascaris equoorum）（2n =2） 基因丢失 1.只存在于一些低等生物体细胞中。在细胞分化时，当需要消除某些基因活性时才发生。 2.采用基因丢失的方式调控是不可逆的。 3.高等真核生物细胞具有全能性。 2. 基因扩增（amplification） 基因扩增是某些基因的拷贝数大量增加的现象,它使细胞在短期内产生大量基因产物满足生长发育的需要. 1 .非洲爪蟾的基因扩增 非洲爪蟾的染色体上有约450拷贝编码 18S r RNA和28S r RNA的DNA，在卵母 细胞中它们的拷贝数扩大了4000倍。 2. 果蝇的多线染色体（polytene）：每条染色体中含有许多相同的DNA分子。 在果蝇卵巢成熟之前，卵巢颗粒中的卵壳蛋白基因被大量扩增。果蝇卵原细胞经过4次分裂产生16个细胞，其中1个是卵母细胞，其余15个是营养细胞，它们为卵细胞的形成提供大量的生物大分子。多线染色体就存在于营养细胞中。 （五）、DNA的重排 接合型转变的模型 1977年Hicks,T.B.等 提出了暗箱模型（cassette model） 活性暗箱（active cassette） 沉默暗箱（silent cassettes） 沉默子（silencers） （六）DNA的甲基化与去甲基化 DNA的甲基化存在于所有高等生物中，并与基因表达调控有关一般来讲，甲基化能关闭某些基因的活性，而去甲基化则诱导基因的重新活化。 在真核生物中，5-甲基胞嘧啶主要出现在CpG序列、CpXpG、CCA/TGG和GATC中 二、转录水平的调控 原核生物的转录调控:负调控-阻遏蛋白 真核生物的转录调控:正调控-转录激活因子 顺式作用元件 反式作用因子 （一）、顺式作用元件 顺式作用元件由一定特殊的DNA序列组成，通常与其参与调控的功能基因连锁存在。它们的作用是调控基因的表达，本身不编码任何蛋白质, 仅仅提供一个作用位点, 要与反式作用因子相互作用而发挥功能。?真核生物的顺式作用元件主要有启动子，增强子及沉默子等 1.启动子 真核和原核生物启动子的比较 2.增强子：能使与它连锁的基因转录频率明显增加的DNA序列 1 增强效应十分明显:10---200倍,甚至上千倍 2 增强效应与其位置和取向无关 3没有基因专一性,与不同的基因组合均表现增强效应 4其增强效应有严密的组织性和细胞特异性,只有特定的