常用的中性盐有硫酸铵、硫酸钠、硫酸镁、磷酸钠、磷酸钾、氯化钾、醋酸钠、硫氰化钾等。在蛋白质的盐析中,以硫酸铵应用最广。 盐析的操作:pH 蛋白质、酶等经过盐析沉淀分离后,产品夹带有盐分,需脱盐处理。常用的方法有透析法、电渗析法和葡聚糖凝胶过滤法等。 * ?与无机沉淀剂相比,有机沉淀剂的优点在于: (1)选择性比较高,即一定浓度的有机沉淀剂只沉淀分离某一种或某一类溶质组分; (2)沉淀后所得产品不需脱盐,残留的沉淀剂通过挥发而易于去除。 有机沉淀剂的缺点是对有些生物大分子如酶类有失活作用,因而常需在低温下操作。 2、有机溶剂沉淀分离法 * 机理: (1)有机溶剂改变了溶液的介电常数。加入有机溶剂后,降低了溶液介电常数,因而增强了溶质分子间的静电作用力,降低了溶质分子与溶剂分子间的相互作用,导致溶质分子间发生聚合而析出。 (2)脱水作用。由于有机溶剂必须溶解在水溶液中,这样就减少了溶质与水的作用,因而使溶质脱水而相互聚集沉淀。 * 3、等电点沉淀法 4、变性沉淀分离法 加热、加有机酸、调pH * 二、萃取分离技术 利用溶质在互不相溶的两相之间分配系数的不同而使溶质得到纯化或浓缩的方法称为萃取。 * 1、有机溶剂萃取 物理萃取即溶质根据相似相溶的原理在两相间达到分配平衡,萃取剂与溶质之间不发生化学反应。 化学萃取则利用脂溶性萃取剂与溶质之间的化学反应生成脂溶
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