发酵机制赖氨酸发酵机制1314节.pptxVIP

二、赖氨酸发酵机理 在大肠杆菌中有三种AK同功酶,代谢调控复杂,生产上一般不用大肠杆菌. 以黄色短杆菌合成赖氨酸为例: 天冬氨酸 ↓天冬氨酸激酶（AK） 天冬氨酸-β-半醛 高丝氨酸脱氢酶↙ ↘DDP合成酶 高丝氨酸 ↘ 高丝氨酸激酶↙ ↓琥珀酰高丝氨酸↘ L-苏氨酸↙ ↓合成酶 赖氨酸 苏氨酸脱H酶↙ ↓ L-异亮氨酸 L- 蛋氨酸 牛牛文库文档分享 黄色短杆菌中天冬氨酸的合成机制 牛牛文库文档分享 赖氨酸合成调节机制 1. 天冬氨酸激酶(AK)为关键酶，在大肠杆菌中有三种同功酶？。 AK1 受苏氨酸和异亮氨酸的协调反馈抑制和阻遏； AK2 受 蛋氨酸反馈阻遏； AK3 受 赖氨酸反馈抑制和阻遏。 2. 天冬氨酸-β-半醛脱氢酶受赖氨酸不完全抑制 二氢吡啶二羧酸合成酶(DDP)等受赖氨酸反馈抑制 二氨基庚二酸脱羧酶受赖氨酸阻遏 3. 高丝氨酸脱氢酶（HD）为两种同功酶, HD1受苏氨酸反馈抑制, HD2受蛋氨酸阻遏。且AK1与HD1, AK2与HD2为同一蛋白携带的双功能酶？ 牛牛文库文档分享 赖氨酸合成调节机制 4. 异亮氨酸合成途径中，异亮氨酸反馈抑制和阻遏苏氨酸脱氨酶 ⑦高丝氨酸脱氢酶活性比⑥二氢吡啶二羧酸合成酶高15倍，使代谢优先向合成高丝氨酸方向 ⑧琥珀酰高丝氨酸合成酶活性高于 ⑨高丝氨酸激酶而优先合成蛋氨酸 5.图5-13的逆转反馈抑制(代谢互锁):乙酰CoA解除 磷酸烯醇丙酮酸羧化酶受草酰乙酸的抑制, 即存在分支途径的一种产物，能够解除另一分支途径中其产物对自身酶的反馈抑制 牛牛文库文档分享 黄色短杆菌中天冬氨酸的合成机制 牛牛文库文档分享 故当蛋氨酸过剩，阻遏琥珀酰高丝氨酸合成酶，合成转向苏氨酸方向. 当异亮氨酸过剩，反馈抑制苏氨酸脱氢酶,积累苏氨酸. 当苏氨酸过剩，反馈抑制高丝氨酸脱氢酶，转向合成赖氨酸. 当赖氨酸过剩和苏氨酸协同反馈抑制天冬氨酸激酶，而终止整个反应. 牛牛文库文档分享 赖氨酸发酵机理分析 在大肠杆菌中有三种AK同功酶,代谢调控复杂,生产上一般不用大肠杆菌. 以黄色短杆菌合成赖氨酸为例: 天冬氨酸 ↓天冬氨酸激酶 天冬氨酸-β-半醛 高丝氨酸脱氢酶↙ ↘DDP合成酶 高丝氨酸 ↘ 高丝氨酸激酶↙ ↓琥珀酰高丝氨酸↘ L-苏氨酸↙ ↓合成酶 赖氨酸 苏氨酸脱H酶↙ ↓ L-异亮氨酸 L- 蛋氨酸 牛牛文库文档分享 赖氨酸育种途径 微生物产生赖氨酸机制复杂，多样. 1. 渗漏缺陷型(不完全切断支路代谢) ，即降低不需要的酶活,而进一步提高所需要的酶活. 2. 切断支路代谢—选育高丝氨酸缺陷型(完全切断支路代谢). 3.选育抗结构类似物突变株遗传性地解除代谢过程的抑制或阻遏作用. 牛牛文库文档分享 赖氨酸育种 4.解除代谢互锁, 例如赖氨酸合成受亮氨酸阻遏.故采用亮氨酸缺陷菌株,抗亮氨酸突变菌株或用苯醌等处理得到亮氨酸渗漏缺陷型菌株. 5.增加前体物合成和阻塞副产物生成, 从生产速度和提高产率角度分析,可应用合适的前体物合成途径. 6.改善细胞膜的透性, 选育主动运输性强的菌株。 在此利用谷氨酸发酵改善细胞膜的透性方法是否可行? GA棒杆菌以糖蜜发酵赖氨酸时，加入红霉素，产量从40.1g/L升至55.8g/L。 7. 温度敏感突变株,即高温使分支途径酶失活而促进主产物的合成. 牛牛文库文档分享 赖氨酸育种 8. 用细胞工程、原生质体融合技术.得到耗糖快,发酵速度快,可提高赖氨酸产量的菌株. 基因工程, 提高关键酶活性,促进产物合成 9. 防止赖氨酸菌回复突变的措施： （1）选择性能稳定的菌株; （2）增加