旺长期烤烟K326内生细菌多样性及部分菌株的酶活筛选-云南大学.PDFVIP

云南大学学报（自然科学版），２０１３，３５（６）：８７４～８８４ ＤＯＩ：１０．７５４０／ｊ．ｙｎｕ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｙｕｎｎａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ 旺长期烤烟Ｋ３２６ 内生细菌多样性 及部分菌株的酶活筛选∗ １ １ １ １ ２ ２ ２ ２ 陈　 微 ，杨　 莹 ，陈　 兴 ，胡巍耀 ，刘冰冰 ，龚娅琼 ，李珊辉 ，李文均 （１．红云红河烟草（集团）有限责任公司，云南 昆明　 ６５０２０２； ２．云南大学 云南省微生物研究所 西南微生物多样性教育部重点实验室，云南 昆明　 ６５００９１） 摘要：作者主要研究了旺长期烤烟Ｋ３２６ 内生细菌的多样性及其产酶特性，共设计８种培养基对不同间作 模式下的烤烟样品进行分离，探讨了所分离得到的内生细菌多样性，并对不同培养基的分离效果进行了评价． 本研究共分离到１９３株内生细菌，分布于３４个已知属及３个潜在新属．对这些内生细菌分析表明，微生物的多 样性较好，其香农指数、辛普森指数及物种丰度分别是２．７４８，０．２５９２４ 和１５４．９．根据旺长期烤烟Ｋ３２６ 的生长特 征，设计不同的分离培养基，计算多样性指数来判断不同培养基的分离效果，结果表明Ｍ５、Ｍ６、Ｔ３号培养基分 离效果最好，Ｍ７、Ｙ号培养基次之．按照不同分类单元，从 １９３株分离菌株中挑选出６７株，进行酶活力筛选，获 得了具有淀粉酶活力的菌株２０株（占２９．９％）、具有蛋白酶活力菌株 １９株（占２８．４％）、具有木聚酶活力的内生 细菌２７株（占４０．３％）、具有纤维素酶活力的内生细菌２９株（占４３．３％）、具有甘露聚糖酶活力的菌株１２株（占 １８．０％）．结果表明本研究所建立的一套针对烤烟内生细菌的分离方法是行之有效的，分离出大量烤烟内生细菌 及具有不同酶活特性的菌株，为后续研究及生产应用奠定了基础． 关键词：烟草；内生细菌；多样性；酶活筛选 － － － 中图分类号：Ｑ９３９．９２　 　 文献标志码：Ａ　 　 文章编号：０２５８ ７９７１（２０１３）０６ ０８７４ １１ 　 　 植物内生菌（Ｅｎｄｏｐｈｙｔｅ）是指在生活史的一定 从烤烟中分离到的纯培养微生物种类较少，分离效 阶段或全部阶段，生活于健康植物组织中的真菌或 果较差．章东方等选用富营养培养基ＴＭ 和ＬＢ，只 ［１］ ［４］ 细菌 ．内生菌能够改变植物及土壤的营养及离子 分离到Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ 一个属 ；黄晓辉等选用牛肉 ［２］ 组成成分，促进植物生长 ，据报道放线菌类内生 膏蛋白胨、高氏培养基来研究不同烤烟品种的内生 ［５］ 菌能够刺激植物产生抗病源真菌的物质来抵御病 细菌分布 ，分离的效果也不理想．本实验主要通 ［３］ 害 ．另一方面，植物不仅能够为微生物的生长提 过模拟烤烟植物内环境，设计添加不同碳氮源的培 供必要的能源物质，而且还能改变微生物类群、数 养基，对烤烟内生细菌进行分离，拟建立一套针对 目或活性．烤烟是我国重要的经济作物，也是研究 烤烟内生细菌的分离行之有效的方法来研究烤烟 的热点材料，由于烤烟植物微环境的选择作用，使 内生细菌的菌群分布．考虑到植物环境中还存在着 得烤烟内存在一些特有的微生物菌群．对烤