抗原致敏及白细胞介素27基因修饰的树突状细胞诱导抗食管.PDFVIP

肿瘤2011 年7 月第31 卷第7 期　Tumor Vol.31, J uly 2011　　 601 DOI:10.3781/j .issn.1000-7431.2011.07.006 Copyright© 2011 by TUM OR Basic Research 基础研究 · 抗原致敏及 白细胞介素27基 因修饰的树突状细胞诱导抗食管癌免疫 的体外研究 1 2 3 1 1 王　雷，单保恩 ，刘　亮，孟宪利 ，王士杰 河北医科大学第四医院　1. 胸外科 ；2 . 科研中心；3. 肿瘤研究所流式细胞室，石家庄　050011 [ 摘要 ]　目的：探讨食管癌细胞抗原致敏、白细胞介素 27 （interleukin 27，IL-27 ）基因修饰的树突状细胞 （dendritic cells，DCs ）疫苗的特异性抗食管癌免疫反应。方法：采用重组逆转录病毒介导 IL-27 基因修饰食管癌患者外周血 DCs ；反复冻融法提取食管癌细胞裂解产物，致敏经 IL-27 基因转染的 DCs ；ELISA 法检测各组 DCs 和细胞毒性 T 淋巴细胞 （cytotoxic T lymphocytes，CTLs ）上清液中IL-27、IL-12 和干扰素 - γ （interferon- γ，IFN- γ）的分 泌水平；FCM 法分析各组 DCs 表面分子 CD1a、CD83、CD80 和 CD86 的表达水平；MTT 法检测 DCs 刺激 T 细胞增殖的活性和 DCs 诱导 CTLs 杀伤食管癌细胞的效能。结果：经 IL-27 基因修饰和抗原致敏后的 DCs 高表达 CD83、CD80 和 CD86 分子，其表达量分别为 （82.67 ±7.92 ）% 、（78.33 ±7.31）% 和 （85.33 ±4.32 ）% ；DCs 上清 液中IL-12 、IL-27 及 IFN- γ分泌量明显提高，分别为 （107.85 ±7.20 ）ng/L、（430.39 ±10.12 ）ng/L 及 （411.97 ± 17.80 ）ng/L ；并且，DCs 明显刺激同源 T 细胞增殖，增强了 CTLs 上清液中IFN- γ水平 [ （751.50 ±31.30 ）ng/L] 。 诱导产生的 CTLs 对食管癌细胞有强大的杀伤作用，显著高于其他组 （P ＜ 0.01 ）。结论：IL-27 基因修饰增强了 DCs 在体外诱导 自体 T 淋 巴细胞产生特异性抗食管癌免疫的能力。其机制可能与 IL-27 基因修饰和抗原致敏活 化了 DCs 抗原提呈第二信号，促进了 DCs 高分泌 IL-27 和 IL-12 因子，活化了T 淋 巴细胞，并致使 CTLs 分泌 IFN- γ的能力增强等密切相关。 [ 关键词 ]　食管肿瘤；树突细胞；免疫疗法；白细胞介素-27 ；转染；抗原致敏 [中图分类号]　R735.1 [文献标志码] A [文章编号]　1000-7431(2011)07-0601-07 In vitro study on anti-esophageal cancer immunity induced by antigen-sensitized and interleukin 27 gene-modified dendritic cells 1 2 3 1 1 WANG Lei , SHAN Bao-en , LIU Liang , MENG Xian-li , WANG Shi-jie 1. Department of Thoracic Surgery; 2. Research Center; 3. Flow Cytometry Laboratory of Tumor Institute, Fourth Hospital of Hebei Medical University, Shi