降钙素基因相关肽抑制动脉损伤后NF-κB表达及其对新生内膜增殖的作用.docVIP

降钙素基因相关肽抑制动脉损伤后NF-κB表达及其对新生内膜增殖的作用 赵然尊，龙仙萍，刘志江，盛 瑾，王冬梅，石 蓓 （563003贵州 遵义，遵义医学院第一附属医院心血管内科） [摘要]　目的 通过降钙素基因相关肽（calcitonin gene related peptide ，CGRP）处理血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）和颈动脉损伤大鼠模型，探讨NF-κB在CGRP调节VSMCs表型改变和动脉损伤后新生内膜增殖中的作用。方法 建立颈动脉损伤大鼠模型，并分为对照组和CGRP组，通过HE染色观察新生内膜形成情况，并Western blot检测两组动物损伤动脉中NF-κB p65蛋白表达情况。以组织块贴壁培养法获得VSMCs，并分为对照组、IL-1β组（给予IL-1β处理）、CGRP组（给予IL-1β+CGRP处理）和CGRP8-37组（在IL-1β+CGRP基础上，加CGRP8-37），Western blot法检测细胞内NF-κB p65蛋白和细胞表型标志蛋白表达变化，MTT法检测细胞增殖能力。结果 ①对照组大鼠的颈动脉损伤后7d时新生内膜明显增加，至28d时基本稳定，而CGRP组7d和28d时新生内膜面积较对照组同时间点显著降低（7d: 2.09±0.26 vs 3.76±0.33；14d：3.52 ±0.41 vs 6.38±0.61，P0.05）；且与对照组比较，CGRP组1周时NF-κB p65蛋白表达水平明显降低（P0.05），而28d时两组NF-κB p65表达水平无差异（P0.05）。②在体外培养VSMCs中，IL-1β处理显著激活细胞NF-κB p65蛋白表达（P0.05），伴随着VSMCs收缩表现标志蛋白SM α-actin表达减少和OPN表达增加（P0.05）；同时再给予CGRP处理后，则显著减弱IL-1β诱导的NF-κB p65蛋白表达（P0.05），且使VSMCs合成表现标志蛋白OPN表达减少。RT-PCR分析获得相一致的结果。同时，CGRP显著抑制IL-1β引起的VSMCs增殖。③ CGRP受体阻断剂CGRP8-37可以阻断CGRP减弱IL-1β诱导的NF-κB p65蛋白表达作用，并抑制CGRP对VSMC表达蛋白调节作用。结论 CGRP与受体结合后抑制NF-κB激活，促进VSMCs分化标志基因表达，从而抑制细胞增殖，降低动脉损伤后新生内膜增殖，这对于防治动脉粥样硬化和血管成形术后再狭窄可能具有重要应用价值。 [关键词]　血管平滑肌细胞；表型改变；降钙素基因相关肽；核因子-κB [中图法分类号] R541.4 [文献标志码] A Effect of Calcitonin Gene Related Peptide on Downexpression of NF-κB and Neointima Formation after Artery Injury Zhao Ranzun， Long Xianping，Chen Panke，Cui Can，Sheng Jin，Wang Dongmei，Shi Bei （Department of Cardiology, the First Affiliated Hospital of Zunyi Medical Universtiy, Guizhou Zunyi 563000） [Abstract] Objective To investigate the effects of calcitonin gene related peptide (CGRP) on down-expression of NF-κB and neointima formation after artery injury through in vitro CGRP-treated cultured VSMCs and in vivo in balloon-injured rat carotid artery. Methods Rats with balloon-injured carotid artery was induced and divided into control group and CGRP group, in which neointima formation was observed by HE staining, the expression of NF-κBp65 protein in injured artery was detected by Western blot. Furthermore, VSMCs were obtai