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抑制组织蛋白酶B表达对胃癌BGC-823细胞黏附、
增殖和侵袭的影响
王涛1 ,李敏2,臧文巧 2, 赵国强2#
(1河南中医学院第一附属医院血液肿瘤科,河南,郑州, 450000
2郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室,河南,郑州,450052)
通讯作者:赵国强 Email: zhaogq@126.com? HYPERLINK /classic/index.php \o 向此地址发信 ??
第一作者: 王涛. 硕士.主治医师. Tel Email: zangwenqiao@
[摘要] 目的:探讨抑制组织蛋白酶B表达对胃癌BGC-823细胞黏附、增殖和侵袭的影响。方法:构建针对CB的siRNA表达载体,脂质体LipofectAmineTM2000转染胃癌细胞株BGC-823。荧光定量RT-PCR和免疫印迹检测CB在各组胃癌细胞中的表达水平;细胞黏附实验检测各组胃癌细胞的黏附能力;细胞侵袭性实验检测各组胃癌细胞的侵袭能力,细胞增殖实验检测各组胃癌细胞的增殖能力。结果:与空白对照组和无关siRNA对照组相比,沉默1组和沉默2组细胞中,CB mRNA的相对表达量显著降低(p0.01);CB蛋白表达被显著抑制;纤维黏连蛋白和基质胶黏附的胃癌细胞数目以及穿透基质胶的胃癌细胞数显著降低(p0.05);并且在2d、3d、4d、5d细胞孔内的吸光度值亦显著减少,差异有显著性(P﹤0.05)。而在无关siRNA对照组和空白对照组之间,CB mRNA的相对表达量、两组的黏附细胞数目以及两组穿透基质胶的细胞数都无显著性差异(p0.05);结论:设计针对CB基因的 siRNA片段构建的siRNA载体能够有效干扰胃癌BGC-823细胞中CB mRNA和蛋白的表达。抑制胃癌BGC-823细胞CB基因表达,可以降低胃癌细胞的生长速度、降低胃癌细胞与基质黏附能力、降低胃癌细胞侵袭和转移的能力。
[关键词]:胃癌;组织蛋白酶B;增殖;侵袭;黏附
[中图分类号] R735.1
The Effect of siRNA Target Gene CB on the adhesion 、invasion and metastasis Capabilities of gatric cancer cells BGC-823
WANG Tao1 ,, LI Min 2, ZANG Wenqiao2,ZHAO Guoqiang2
1Department of Hemato-tumor, The First Affiliated Hospital College Of TCM of Henan, Zhengzhou 450000, 2Department of Microbiology and Immunology, Medical college of Basic Science, Zhengzhou University, Zhengzhou 450052
[Abstract] AIM:To explore the effect of siRNA target gene CB on the adhesion 、invasion and metastasis Capabilities of gatric cancer cells BGC-823 . METHODS: Construct siRNA expression vector for CB using molecule clone and LipofectAmineTM2000 was used to transfect BGC-823, a kind of gastric tumor cell line. Fluorescent quantitative PCR and western blot were used to test the expression of CB in BGC-823 cells. Techniques of cell adhesion experiments, invasion assay and proliferation test were used to investigate the adhesion, invasion and proliferation of BGC-823 cells respectively. RESULTS: BGC-823 cells in silencing groups showed lower CB mRNA compared with unrelated siRNA and blank control groups; The number of BGC-823 cells adhering and p
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