食品毒理学评价..pptVIP

食品安全性评价 毒性试验 急性毒性试验 局部毒性试验 蓄积毒性试验 亚慢性和慢性毒性试验 遗传毒性 生殖发育毒性 急性毒性试验 一次或24小时内多次给予受试物，了解动物所产生的急性毒性反应极其严重程度，中毒死亡的特征以及可能的死亡原因，观察受试物毒性反应与剂量的关系。 操作步骤 健康动物的选择 性别辨认 动物称重、编号和分组 剂量设置 受试物的配制 灌胃 中毒体征和动物死亡情况观察 LD50的计算 LD50的计算方法 改进寇氏法 霍恩法 序贯法 Bliss法 改进寇氏法 是利用计量对数与死亡率呈S型曲线而设计的方法，又称平均致死量法。本法要求每个染毒剂量组动物数要相同，各剂量组组距呈等比级数，死亡率呈正态分布，最低剂量组死亡率20%，最高剂量组80%。 计算公式如下： M=Xk-i(∑p-0.5) Sm=i(∑pq/n)1/2 M:㏒ LD50 i：相邻两剂量组之对数差值 Xk：最大剂量的对数值 ；q：存活率 ∑p：各组死亡率之和; n:每组动物数 组别 剂量对数 动物数 死亡数 1.1761 10 0 1.2561 10 2 1.3361 10 5 1.4161 10 7 1.4961 10 9 M=Xk-i(∑p-0.5)=1.4961-0.08（2.3-0.5） Sm=i(∑pq/n)1/2 =0.08（0.16/10+0.25/10+0.21/10+0.09/10）1/2 霍恩法 利用剂量对数与死亡率的转换数呈直线关系而设计的方法，又称平均移动法或剂量递增法。该法使用动物数少，可直接查表求出LD50 。 该法推荐使用4个染毒剂量，要求每组动物数相等，一般用4-5只动物，且剂量组按等比级数排列。 序贯法 又称平均数法、阶梯法或上-下法，先以一个剂量进行实验，若动物死亡，则以下一个较小剂量试探；若动物存活，则以较大剂量试探，依次类推，最终求出LD50。 LD50 = (∑x f)/n n: 使用的动物总数；X：每个剂量组的剂量 f : 每个剂量组使用动物数 举例：小鼠经口给与某化学物染毒，10mg/kg剂量试探，预计使用4个剂量组，剂量组距对数值0.2，设计使用12只动物，结果如下 ∑x f=12.59×2+10×5+7.94×4+6.31×1 该法优点是节省动物，一般12-14只左右动物即可完成实验。 缺点？ 蓄积毒性试验 某些毒物多次以小剂量反复进入体内，可表现出机体对该毒物的反应性增强，即一次染毒不引起反应的剂量，如多次重复染毒，则可能引起明显的反应甚至死亡。 毒物的蓄积与进入机体的毒物剂量、重复染毒的间隔时间、毒性及代谢特点和机体反应特性条件有关。 蓄积类型 物质蓄积：实验动物反复多次接触化学物后，用化学分析方法能够检测到机体内存在该化学物或代谢产物 功能（机能）蓄积：有的化学物在长期接触后，机体内虽不能检测到机体内存在该化学物或代谢产物，却出现了慢性毒性作用。 功能蓄积可能 是由于机体内的化学物或其代谢产物的数量极微，不能检测出物质的蓄积 或者是由于每次机体接触化学物后所引起的损害累积所致 蓄积作用的检测方法 应用化学分析或其他技术测定化学物进入机体后在体内含量的变化过程。该方法可确定化学的半衰期 生物学方法：即将一次染毒与多次染毒所产生的生物学效应进行比较，故该法所检测的蓄积性不能区分功能蓄积和物质蓄积。 实验方法 选用大鼠或小鼠经口灌胃或腹腔注射方法进行试验，选用至少40只动物随机分为试验和对照组，雌雄各半。在1/20-1/5 LD50 以相同的染毒途径、定时定量对试验组染毒。 当试验组累积发生一半动物死亡时终止染毒。 另外一种测定毒物蓄积系数的实验方法是动物每天按体重给一定剂量的毒物染毒，第1-4天给0.1 LD50剂量，然后染毒计量按1.5倍每4天递增一次，实验持续20天。 蓄积系数 K=∑ LD50[n]/∑ LD50 0-1 极强蓄积 1-3 强蓄积 3-5 中等蓄积 〉5 弱蓄积 ∑ LD50：一次染毒50%的致死剂量 ∑ LD50[n]：引起50%动物死亡的累积总剂量 虽然蓄积系数法具有一定使用价值，但是某些化