小鼠CXC趋化因子配体1ELISA试剂盒.PDFVIP

小鼠 CXC趋化因子配体 1 ELISA 试剂盒 # SEKM-0046 产品编号 ： 适用于小鼠血清、血浆或细胞培养上清液等样本 仅供研究，不用于临床诊断 订购热线:400-968-6088 ﹡技术支持邮箱:service@ 公司官网: 目 录 背景介绍……………………………………………………………………………… 检测原理……………………………………………………………………………… 注意事项……………………………………………………………………………… 安全提示……………………………………………………………………………… 试剂盒组成及储存…………………………………………………………………… 自备实验器材………………………………………………………………………… 样品收集及储存……………………………………………………………………… 试剂准备……………………………………………………………………………… 检测步骤……………………………………………………………………………… 结果判断……………………………………………………………………………… 参数表征……………………………………………………………………………… 参考文献……………………………………………………………………………… 常见问题分析及解决办法…………………………………………………………… 背景介绍： 小鼠KC，又称CXCLl，其编码一个约8kDa 的分泌蛋白，属于alpha （CXC）趋化因子 家族，小鼠KC 的cDNA编码96个氨基酸残基的前体蛋白，N末端19个氨基酸残基经剪切产 生77个氨基酸残基的成熟KC蛋白。小鼠KC 的蛋白序列与另一个alpha趋化因子MIP-2具 有63%的序列同一性。与其他alpha趋化因子类似，小鼠KC是中性粒细胞的强诱导剂和激 活剂。小鼠KC和MIP-2 的生物学活性是通过独特的小鼠IL-8受体来介导的。小鼠IL-8R 与人IL-8Rß和IL-8Rα分别具有71%和68%的序列同一性。由于在小鼠中还没有鉴定到IL-8 同源物，所以MIP-2和KC被认为在功能上与IL-8相似，在小鼠中作为主要的促炎症反应 alpha-趋化因子。 检测原理： Solarbio (Solarbio ®)ELISA 试剂盒采用基于双抗体夹心法的酶联免疫吸附检测技术。将 抗小鼠CXCL1单克隆抗体包被在酶标板上；分别加入梯度稀释的标准品和预稀释的样本， 标准品和样本中的小鼠CXCL1会与酶标板上的包被抗体充分结合；洗板后加入生物素化抗 小鼠CXCL1抗体，该抗体会与板子上包被抗体捕获的标准品和样本中的小鼠CXCL1发生 特异性结合；洗板后加入辣根过氧化物酶 （HRP）标记的链霉亲和素，生物素与链霉亲和素 会发生高强度的非共价结合；洗板后加入显色剂底物TMB，若反应孔中样品存在不同浓度 的小鼠CXCL1，则HRP 会使无色TMB 变成不同深浅 （正相关）的蓝色物质，加入终止液 后反应孔会变成黄色；最后，在λmax 450nm（OD 450nm）处测定反应孔样品吸光度（OD）， 样本中的小鼠CXCL1浓度与OD 成正比，通过绘制标准曲线和四参数拟合软件便可计算出 样本中小鼠CXCL1 的浓度。 原理图： 注意事项：※※※ 1. 试剂盒应在有效期内使用，请不要使用过期的试剂。 2. 试剂盒未使用时应保存在2-8℃冰箱，已复溶但未用完的标准品，请丢弃。 3. 试剂盒使用前请在室温恢复30min，且充分混匀试剂盒里的各种成份及制备的样品。 4. 在试验中标准品和样本建议作复孔检测，且加入试剂的顺序应保持一致。 5. 为避免交叉污染，请在试验中使用1次性试管，枪头，封板膜 （※）及洁净塑料容器。. 6. 浓缩生物素化抗体和浓缩酶结合物的体积较少，在运输过程中微量液体会沾到管壁及瓶 盖上，使用前请离心处理 （5-10 S 即可），使管壁上的液体集中在管底部，取用时，请 用移液器小心吹打几次。 7. 除了试剂盒中的浓缩洗涤液和终止液可以通用外，请不要使用其他来源试剂盒内含的试 剂代替本试剂盒中的某单个组分。 8. 为保证结果准确，每