琼脂糖细胞蜡块优化..pptVIP

琼脂糖细胞蜡块优缺点 琼脂糖细胞蜡块的优化方向 明确琼脂糖可反复冻融的次数，保证琼脂糖的质量 明确琼脂糖最适浓度 确定细胞在蜡块中的位置 实验目的 了解琼脂糖细胞蜡块切片的质量与病理诊断的关系 探究琼脂糖反复冻融对琼脂细胞蜡块切片的影响。 研究不同浓度琼脂糖对制作细胞蜡块的影响。 确定细胞在蜡块中的位置对切片质量的影响。 实验设计 三、伊红标记细胞石蜡包埋 预期结果 将通过研究琼脂糖细胞蜡块切片的质量与病理诊断的关系，提高细胞病理技术，为病理诊断提供更好的实验室依据。 琼脂糖反复冻融是否影响琼脂糖细胞蜡块的质量，及其反复冻融次数应该控制的范围。 分析不同浓度琼脂糖对琼脂糖细胞蜡块质量的影响及得出最适琼脂糖浓度。 分析伊红标记细胞对琼脂糖细胞蜡块的影响，认为伊红方便显示蜡块中的细胞并且对切片HE染色无影响。 实验注意事项 离心的胸腹水标本应及时固定防止细胞自溶影响实验结果。 固定后忘标本中加入液态琼脂糖时应迅速，防止琼脂糖未与细胞混合就凝固。 * 琼脂糖细胞蜡块的优化 实习生：梁泳仪 指导老师：欧阳能太 琼脂糖细胞蜡块的优缺点 实验目的 实验设计 预期结果 实验注意事项 目录 优化方向 优点 缺点 使单个分散的细胞标本聚集起来。 解决了直接离心包埋细胞时细胞散落等问题。 降低了细胞的损失量保留尽量多的细胞。 琼脂糖遇高温即融，温度下降后又重新凝固，温度难以控制。 烤片后载玻片上的蜡片间隙中琼脂糖融化，封片后镜下可见水珠样空泡。 琼脂细胞蜡块无色难以观察。 编号 1 2 3 4 5 6 7 冻融次数 1 5 10 15 20 25 30 离心弃去上清液,在对应的离心管中分别加入预先处理好的琼脂凝胶并迅速震荡放入离心机中(600g离心5min)。 一、反复冻融的琼脂糖对制作细胞蜡块的影响 1.材料与方法 1.1材料：收集腹水标本、同批5%琼脂糖凝胶 1.2方法： 收集腹水细胞分装于7支离心管中并编号1—7号。预先处理琼脂糖如下表： 用5-10倍量10%中性福尔马林缓冲液分别浸泡固定七份标本2h（将细胞轻轻打散后再次离心以便充分固定）。 放入4℃冰箱中冷冻10-15min。 取出用烟纸包好进行常规蜡块包埋、切片、ＨＥ染色，镜下观察。 二、不同浓度琼脂糖对细胞蜡块的影响 1.材料与方法 1.1材料：收集腹水标本 1.2方法： 分别配置1%，2%，3%，4%，5% 五个不同浓度的琼脂糖凝胶 收集腹水细胞分装于5支离心管中并编号1—5。 用5-10倍量10%中性福尔马林缓冲液分别浸泡固定五份标本2h（将细胞轻轻打散后再次离心以便充分固定）。 离心弃去上清液,在对应的离心管中分别加入各个浓度的琼脂糖凝胶并迅速震荡放入离心机中(600g离心5min)。 放入4℃冰箱中冷冻10-15min。 取出用烟纸包好进行常规蜡块包埋、切片、ＨＥ染色，镜下观察。 1.材料与方法 1.1材料：收集腹水标本 1.2方法： 收集腹水细胞分装于2支离心管中并编号1、2号。 用5-10倍量10%中性福尔马林缓冲液分别浸泡固定两份标本2h（将细胞轻轻打散后再次离心以便充分固定）。 放入4℃冰箱中冷冻10-15min。 取出用烟纸包好进行常规蜡块包埋、切片、ＨＥ染色，镜下观察。 弃去上清液，于1号离心管中加入伊红数滴，2号离心管不作处理，均倒入预热的琼脂糖液并迅速震荡放入离心机中(600g离心5min)。 *