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上述准备好的树脂，加少量水搅拌后倒入保持垂直的色谱柱中，使树脂沉下。如果把粒度大小范围较大的树脂和多量的水搅拌后分几次倒入，柱子上下部的树脂粒度往往会不一致。另外在离子交换中要注意不让气泡进入树脂层。如果有气泡进来，样品溶液和树脂的接触就不均匀。因此要注意把液面保持在树脂层的上面。滴加时要注意不要把树脂冲散。放一块脱脂棉或一层玻璃丝也可以避免冲散树脂。 样品量与树脂量的比例：每一种树脂都有一定的交换当量（1g干燥树脂理论上能交换样品的毫克当量数），如强碱201×4为3.5，强酸1×7为4.5等。强酸1×7的4.5毫克当量/克,就是说这种树脂的1克能够交换丙氨酸89.09×4.5毫克（注：丙氨酸的分子量为89.09）。如果用阳离子交换树脂，样品可以加到全交换当量的1/2,用阴离予交换树脂，样品可以加到全交换当量的1/4～1/3。 色谱操作： 有时要使用100目以下的树脂，但流速较慢需加压。树脂越细或色谱柱越长，所加压力就越大。洗脱所用的洗脱液可以是均一的，也可以是梯度的，关于树脂量、色谱柱的粗细、展开溶剂量和流速的关系，可见下表 五、在中草药有效成分的分离、富集中的应用 ? 大孔吸附树脂对中草药化学成分如生物碱、黄酮、皂苷、香豆素及其他一些苷类成分都有一定的吸附作用。对糖类的吸附能力很差，对色素的吸附能力较强。 在皂苷类化合物分离、富集中的应用 在测定人参总皂苷的含量时应用D－101型大孔吸附树脂对样品进行处理，人参皂苷可完全吸附在树脂柱上，且易于解吸回收，回收率为 94.58％，而且此树脂柱经充分淋洗后即可重复使用，方法简便。 用大孔吸附树脂法提取蒺藜总皂苷。将蒺藜的提取液上D-101型大孔吸附树脂柱，用水洗至流出液无色后，用800mL／L乙醇洗脱至薄层检查无蒺藜总皂苷为止。这样制得的蒺藜黎总皂苷可有效去除糖类等水溶性杂质及大部分脂溶性杂，皂苷的得率也明显优于传统方法。 黄酮类化合物分离、富集中的应用 用大孔树脂分离葛根中的总黄酮，将葛根的70％乙醇提取的浓缩液加到大孔树脂柱上，先用水洗脱，再用70％乙醇洗脱至TLC检查无葛根素斑点为止。这样制得的葛根总黄酮的收率为9.92％（占生药总黄酮的84.58％），高于正丁醇法的 5.42％， 2种方法的主要成分基本一致。用大孔吸附树脂对黄酮类吸附效果较好，具有操作简便、树脂再生容易、有机溶剂用量小、提取率高的特点。 在苷类化合物分离、富集中的应用 ? 在对赤芍总苷的生产工艺进行研究中发现赤芍的70％乙醇提取液浓缩后上大孔吸附树脂柱，水洗脱后用20％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩即得赤芍总苷，收率为5％以上，且其中所含的芍药苷占75％以上。具有操作简便、树脂再生容易、得率恒定、产品质量稳定等特点。 在酚性和酸性化合物的分离、富集中的应用 ? 在川芎提取、纯化工艺条件的实验研究中发现乙醇回流提取，浓缩提取液后上大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用30％乙醇洗脱，所得洗脱液浓缩即为川芎总提取物，其中川芎嗪和阿魏酸的含量约占25％～29％，总收率为0.6％。此法简便、准确，适用于生产。六味地黄丸的水煎液过D－101型大孔吸附树脂柱，其中的丹皮酚约98％可被吸附，马钱素86％被吸附。此法有效地减少服用时的剂量。 在生物碱类分离、富集中的应用 传统分离纯化生物碱一般用阴离子交换树脂。因解吸时需要用酸、碱或盐类洗脱剂，引人杂质，给后来的分离带来不便。换用吸附树脂则可避免此类问题。如用AB－8型树脂提取喜树碱，可直接得到含量约为50％的产品。小檗碱、莨菪碱可用非极性吸附树脂吸附纯化。因吸附树脂可用有机溶剂进行解吸，蒸干溶剂后不会给产品中引入杂质，且解吸容易，洗脱峰集中。是富集生物碱类物质的较好方法。 另外，对大孔吸附树脂吸附富集不同中草药有效部位的特性研究表明，其吸附力强弱的规律是：黄酮＞生物碱＞酚性成分＞＞无机物。因此提示使用同一种树脂富集不同中草药的有效部位是可行的，但是应选择适宜的树脂型号和合适的条件，调整上柱药液与树脂用量的比例，保证比上柱量较低的有效部位和成分也能保留在树脂上。是充分利用大孔吸附树脂的一种新的思路。 六、大孔吸附树脂 在新药研究中的应用 应在成品中建立树脂残留物或裂解物的检测方法，制订合理的限量（二类以上新药可仅控制原料），并列入质量标准正文。若为苯乙烯骨架型大孔吸附树脂残留物检查项目暂定为：苯（＜2ppm）、甲苯（＜890ppm）、二甲苯（＜2170ppm）、苯乙烯、烷烃类、二乙基苯类（二乙稀基）及其它可能因树脂引入的有机残留物等，其限量不能高于国家标准或国际通用标准。 第二节 离子交换树脂 离子交换是利用一种不溶性高分子化合物，它的分子中具有解离性基团（交换基），在水溶液中能与溶液中的其他阳离子