姜黄素对人鼻咽时癌放射残存细胞株cne2ztr12增殖 侵袭 迁移及凋亡的影响.docxVIP

姜黄素对人鼻咽癌放射残存细胞株CNE．2Z．Trl2 姜黄素对人鼻咽癌放射残存细胞株CNE．2Z．Trl2 增殖、侵袭、迁移及凋亡的影响 摘要 【目的】鼻咽癌放射治疗后的局部复发和远处转移是病人死亡的主要原因之一。 本实验观察研究姜黄素对人鼻咽癌细胞系(CNE-2z)经放射处理后存活的，具有放 射抵抗潜能的细胞CNE-2Z．Trl2(以下简称Trl2)增殖、侵袭、运动及凋亡的影响， 并探讨其作用的可能机制，为姜黄素在鼻咽癌放射增敏和放疗后复发的鼻咽癌治疗 中的应用提供体外试验依据。 【方法】人鼻咽癌细胞系CNE．2Z经放射线处理后继续培养获得放射残存细胞 Trl2，PCR检测其线粒体DNA4977bp有无缺失；RT．PCR检测其EGFR mRNA的表 达情况。体外培养的Trl2细胞经不同剂量姜黄素处理后，用MTT法观察对细胞增殖 的抑制，流式细胞术检测细胞周期和凋亡率的改变，采用考马氏亮蓝R．250染色光镜 下观察姜黄素处理对Trl2的细胞骨架的作用；扫描电镜观察姜黄素处理后细胞表面 形态结构、凋亡及坏死的形态；体外侵袭、运动实验检测姜黄素对Trl2细胞侵袭、 运动能力的影响；RT-PCR检测姜黄素处理后Trl2细胞EGFR mRNA的表达； Western．bIot检测姜黄素处理后Trl2细胞凋亡抑制基因bcl．2表达。 【结果】(1)Trl2及其母系CNE．2Z的线粒体DNA4977bp均未被证实缺失突 变。(2)Trl2细胞EGFR mRNA表达增高，与母系CNE-2Z比较，差异有显著性 (P．O．0 1)。(3)姜黄素对Trl2细胞的生长和增殖都具有一定程度的抑制作用， 阻断细胞于S期和G2／M期。(4)姜黄素处理后Trl2细胞侵袭、运动能力减弱，并 成剂量依赖性。(5)姜黄素处理后扫描电镜观察，细胞表面微绒毛明显缩短、减少。 (6)姜黄素处理后Trl2的细胞骨架稀疏，应力纤维减少。(7)姜黄素处理后Trl2 细胞EGFR mRNA表达减少，差异有显著性(尸O．01)。(8)姜黄素处理后扫描电 镜观察，可见凋亡小体，有坏死细胞出现，都随剂量增加而增多。(9)姜黄素处理 后Trl2细胞凋亡率增加，并呈剂量效应关系。(10)姜黄素处理后Trl2细胞凋亡抑 制基因BCL-2蛋白表达减少。 【结论】(1)细胞线粒体DNA4977bp片断缺失可能是细胞辐射后的生物学标 【结论】(1)细胞线粒体DNA4977bp片断缺失可能是细胞辐射后的生物学标 志之一，Trl2细胞可能不存在缺失；(2)Trl2细胞辐射抗性增强，这可能与EGFR 表达增高有关；(3)姜黄素可以有效抑制Trl2细胞的生长和增殖，具有明显的量效 关系，细胞周期的阻滞可能是其影响因素之一；(4)姜黄素可以有效抑制抑制Trl2 细胞的侵袭、运动，这可能与姜黄素对细胞微绒毛、细胞骨架的影响及EGFR表达 降低有关；(5)姜黄素可以诱导Trl2细胞的凋亡，可能与其可以从蛋白水平抑制 Trl2细胞BCL一2的表达有关。 【关键词】 姜黄素；鼻咽癌；线粒体DNA；EGFR；细胞周期；增殖；侵袭 与运动能力：细胞骨架；凋亡 Effect Effect ofCurcumin on Proliferation，Invasion，Migration and Apoptosis of Radiated Survival Cell Strain CNE-2Z-Trl2 of Human Nasopharyngeal Carcinoma Abstract 10bjective]The main causes of patient’s death are loco—regional recurrence and distant metastasis after nasopharyngcal carcinoma radiotherapy．The objectives are to study the effect ofCurcumin on proliferation，invasion，movement ability and apoptosis of radiated survival cellstrain CNE-2Z-Trl2 of human nasopharyngeal carcinoma cell line CNE-2Z and possible mechanism．This can provide test foundation／n vitro for Curcumin treatment of postradiotherapy reerudescent nasopharyngeal carcinoma and radiosensitization． 【